2015 Fiscal Year Annual Research Report
RNA結合タンパク質がファインチューニングする翻訳開始制御機構
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25291007
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
藤原 俊伸 近畿大学, 薬学部, 教授 (80362804)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
泊 幸秀 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (90447368)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | microRNA / 翻訳制御 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までにmicroRNAによる翻訳抑制の標的が翻訳開始因子eIF4Aで有ることを、代表者はヒトで、分担者はショウジョウバエでそれぞれ証明した。具体的には、microRNA存在下では翻訳開始複合体からeIF4Aが解離していた。次に、どのような分子機構得でeIF4Aが標的mRNAから解離しているかを証明する必要がある。そこで、本年度では代表者は、mRNP pull dowm実験系において、microRNA存在下において標的mRNA上に形成される複合体の解析を質量分析することを試みた。現在、これまで用いていたGST融合λペプチドとその結合配列であるbox B配列用いたGST pull down実験系から、mRNAの3'UTRに直接FLAGペプチドを結合させ、抗FLAG抗体を用いた免疫沈降法に手法を変え解析途中である。また、HuDが関与する翻訳制御ネットワークの統合的解析を実施するため、これまでHuDと特異的に結合するシグナル伝達因子Akt1のリン酸化型（活性型）とその標的候補であるeIF4Bとの相関を解析した。その結果、HuD 依存的に翻訳開始複合体にリクルートされる活性型Akt1 が、eIF4B をリン酸化し翻訳を活性化させるというモデルは、eIF4B の変異体およびeIF4B のノックダウン実験など、代表者のこれまでの研究でほぼ証明された（未発表・投稿準中）。代表者が構築したin vitro翻訳系では、レポーターmRNAからの翻訳とmRNAの安定性を同時に解析可能である。そこで、京都大学・竹内理博士との共同研究により、nucleaseの１つであるRegnase-1による翻訳依存的なIL-6 mRNAの分解機構を発見した。一方分担者は、存在が予想されていたものの未同定であったpiRNAの末端を削り込み、成熟させるタンパク質Trimmer （トリマー）を同定した。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Regnase-1 and Roquin Regulate a Common Element in Inflammatory mRNAs by Spatiotemporally Distinct Mechanisms.2015
Author(s)
Mino T, Murakawa Y, Fukao A, Vandenbon A, Wessels HH, Ori D, Uehata T, Tartey S, Akira S, Suzuki Y, Vinuesa CG, Ohler U, Standley DM, Landthaler M, Fujiwara T, Takeuchi O.
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Journal Title
Cell
Volume: 21
Pages: 1058-1073
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] PI4K-beta and MKNK1 are regulators of hepatitis C virus IRES-dependent translation.2015
Author(s)
Lupberger J, Casanova C, Fischer B, Weiss A, Fofana I, Fontaine N, Fujiwara T, Renaud M, Kopp A, Schuster C, Brino L, Baumert TF, Thoma C.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 5
Pages: 13344
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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