2015 Fiscal Year Annual Research Report
真核生物リボソーム生合成における５ＳｒＲＮＰ複合体の形成機構と機能の解明
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25291008
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
姚 閔 北海道大学, 先端生命科学研究科(研究院), 教授 (40311518)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | リボソーム生合成 / 5S rRNP / Rrs1 / Rpf2 / 5S rRNA / X線結晶解析 / 相互作用解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
真核生物リボソームの5S rRNA前駆体（トランス因子，リボソームタンパク質，5S rRNA，からなるrRNP複合体）は他のrRNAとは異なり，核内においてRNAポリメラーゼIIIによって合成され，特殊な経路を経て成熟した後に，リボソーム前駆体pre-90Sと会合することによって，リボソームの最終的な成熟を開始させることが明らかになった．本研究では，X線結晶構造解析の手法を用いて，5S rRNA成熟に関わる各因子間の相互作用と構造変化を示すスナップショット像を解析することで，5S rRNAの成熟機構に迫る．また，タンパク質合成装置リボソームの品質管理における5S rRNP複合体の役割を解明する．
本研究の目的を達成するために，平成26年度までに，Rpf2-Rrs1複合体のコア構造（Rpf2：10-254aa；Rrs1f：18-114aa）を明らかにし，構造および生化学実験に基づいて，この複合体が，90Sと5S rRNA，RpL5，RpL11をつなぐアダプターとしての機能を持つことを提案した．平成27年度は，Rpf2-Rrs1-5S rRNA複合体の構造解析を進め，安定なRpf2-Rrs1-5S rRNA複合体について大量調製を試みた．まず，in vitro転写により，5S rRNAの大量調製を行い，その後，様々な精製条件を用いた試行錯誤を繰り返したところ，Rpf2-Rrs1-5S rRNA複合体の再構築に成功し，結晶化のスクリーニングへ進めた．今後，良質な単結晶が得られたら，Rpf2-Rrs1-5S rRNAの構造解析を行い，提案したモデルを検証し，リボソーム成熟における5S rRNP複合体の役割を追究する．
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(2 results)
