2016 Fiscal Year Annual Research Report
Study on the mechanism by which yellow substance increases enzymatic cellulose degradation and isolation of novel yellow substance
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25292049
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
粟冠 和郎 三重大学, 生物資源学研究科, 教授 (20154031)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
粟冠 真紀子 三重大学, 生物資源学研究科, 学術研究員 (00422882)
五十嵐 康弘 富山県立大学, 工学部, 教授 (20285159)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 黄色色素 / セルラーゼ / ヘミセルラーゼ / セルロソーム / エンドグルカナーゼ / セルロース分解 / Clostridium thermocellum / Clostridium josui |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、①C. thermocellum由来の黄色色素の化学構造の決定、②黄色色素のセルロース分解促進機構の解明、③C. thermocellum以外のセルロース分解菌からの黄色色素の単離と構造解析、④C. thermocellum由来の黄色色素と構造の類似した天然化合物または合成化合物のClostridiumおよび糸状菌由来のセルロース分解活性の促進効果の検討、⑤天然バイオマス（リグノセルロース）分解への黄色色素の応用、を目的としている。
前年度の研究において、Clostridium josuiの黄色色素にもセルラーゼによる分解性を高めることが示したほか、ゲノム解析を行い、さらに遺伝子導入法を開発した。今年度は、遺伝子導入の効率を高めることを目的として、遺伝子導入の際の阻害要因の一つである制限酵素の特性を調べた。その結果、本菌の制限酵素は、GATCのAがメチル化されたDNAを切断することを明らかにした。また、その遺伝子の開始コドンが一般的なATGではなく、ATAである可能性が高いことを見出した。また、新たに構築した発現ベクターにC. josuiのセルラーゼCel48A遺伝子を連結したものを導入したところ、Hisタグ抗体で検出され、その発現が確認された。無処理のアビセルとC. josui由来の黄色色素を吸着させたアビセルに対する、C. josuiのセルラーゼCel5B（単独）とCel5B－CipA複合体の活性を比較したところ、どちらの基質に対してもCel5B－CipA複合体の方が高い活性を示したが、両校素とも黄色色素吸着セルロースをよく分解したことから、黄色色素の効果は複合体形成にかかわらず現れることが分かった。
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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