2015 Fiscal Year Annual Research Report
AM菌におけるストリゴラクトン誘導性共生因子の解明
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25292066
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| Research Institution | Osaka Prefecture University |
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Principal Investigator |
秋山 康紀 大阪府立大学, 生命環境科学研究科(系), 教授 (20285307)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | アーバスキュラー菌根菌 / Myc factor / ストリゴラクトン / キトオリゴ糖 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヘテロ多糖構造を有するAM菌の細胞壁キチンから生成し得るオリゴ糖断片として，部分N-脱アセチルキチン（partially N-deacetylated chitin，DAC）3糖およびキトサン2～6糖およびグルコサミンをイネ（Oryza sativa cv. Nipponbare BL2）の発芽3日後の実生に処理し，6時間後の根におけるAM共生マーカー遺伝子（AM1，AM2，AM3，RAM1）および防御応答関連遺伝子（PAL，KSL4）の発現量をqRT-PCRにより測定した。その結果，DAC3糖，キトサン2～6糖により共生マーカー遺伝子および防御応答関連遺伝子の発現誘導が見られ，特にDAC3糖，キトサン3～5糖がこれら遺伝子を強く誘導した。DAC3糖およびキトサン2～4糖はイネのLysM型キチン受容体であるOsCERK1の欠損変異体においても野生型と同様にマーカー遺伝子の発現を強く誘導した。次に，N-脱アセチルキトオリゴ糖が実際にAM菌の菌体から分泌されているのかを検証した。AM菌R.irregularisを滅菌水中, 30°Cで7日間静置培養した後，菌体を濾別し菌分泌物を得た。これを重水素無水酢酸（(CD3CO)2O）を用いてN-アセチル化した後，WGA (wheat-germ agglutinin)-アガロースによりキチンオリゴ糖を選択的に回収しLC-MS分析を行ったところ，重水素ラベル化されたDAC3糖およびキトサン3糖が検出された。合成SLであるGR24を1uM含む滅菌水中でAM菌を培養し，同様に分析・定量を行ったところ，GR24の添加によってDAC3糖およびキトサン3糖の分泌量はそれぞれ1/6程度まで減少していた。このことから，AM菌はSLを感知することにより非共生的(asymbiotic) 生育から前共生的(presymbiotic)生育に切り替わると菌体からのDAC3糖およびキトサン3糖の分泌を抑制することが示唆された。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(2 results)
