2014 Fiscal Year Annual Research Report
高次宿主制御を司るバキュロウイルス組織トロピズムの分子解剖
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25292196
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
勝間 進 東京大学, 農学生命科学研究科, 准教授 (20378863)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | バキュロウイルス / 組織トロピズム / 行動制御 / 経口感染 / カイコ / BmNPV / 非コードRNA / トランスクリプトーム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
(1)経口感染が成立する仕組みの解明：チョウ目昆虫に感染するバキュロウイルスは、中腸から侵入し全身へとその感染が広がる。中腸は最初に感染する組織であるが、ウイルス増殖のレベルは低い。中腸におけるウイルス感染を詳細に検討するため、野生型、および経口感染ができない変異型BmNPVを経口感染させたカイコ幼虫の中腸を継時的にサンプリングし、RNA-seqを行った。その結果、中腸におけるウイルス増殖は極めて低レベルであることが確認された。また、発現変動する宿主遺伝子の同定も行った。
(2)非コードRNAの解析：22種類の非コードRNAノックアウトウイルスを作成し、経口感染に関わる非コードRNAのスクリーニングを行った。その結果、経口感染に関わる非コードRNAを2種類同定することに成功した。
(3)systemic infectionに関与する遺伝子の機能解析：バキュロウイルス感染による異常行動が低下する変異体の解析から、systemic infectionおよび行動に関与する因子としてARIF-1を同定した。詳細な解析の結果、arif-1変異体ではptp変異体と同様に脳への感染が遅延することによって行動が低下していることが判明した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
経口感染に関与するバキュロウイルスの非コードRNAを2種類同定することに成功した。これは、バキュロウイルスが持つ機能性長鎖非コードRNAを発見した最初の例である。また、新たな行動関連遺伝子としてarif-1を同定し、そのメカニズムを部分的に解明することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
(1)組織トロピズムに関与するウイルス遺伝子の機能解析：申請者はマーカー挿入型変異体を用いたスクリーニングから、絹糸腺でのウイルス増殖抑制に関わるウイルス遺伝子bv/odv-e26の同定に成功しているが、その作用メカニズムについては不明である。今年度はRNA-seq解析を行い、bv/odv-e26変異ウイルスに感染した組織におけるトロピズム異常について、転写レベルでの解析を行う。
(2)非コードRNAの解析：昨年度までに経口感染に関わる非コードRNAを2種類同定している。今年度はその作用機序や細胞内局在などを調査する。
(3)systemic infectionに関与する遺伝子の機能解析：昨年度までにsystemic infectionおよび行動に関与する因子としてARIF-1を同定している。今年度はその作用機序について、各種ドメイン欠損変異体を用いた解析を実施する。
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| Causes of Carryover |
変異体を用いたスクリーニングが部分的に遅延し、そのために予定していたトランスクリプトーム解析やqPCR解析にあてた費用が次年度に繰り越しとなった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
今年度中にRNA-seqやqPCRを行い、計画を遂行する。
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