2013 Fiscal Year Annual Research Report
免疫プロテアソームを標的とする自己免疫疾患治療薬の天然資源からの探索
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25293025
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
塚本 佐知子 熊本大学, 生命科学研究部, 教授 (40192190)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 免疫プロテアソーム / 自己免疫疾患 / 創薬 / 天然資源 |
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| Research Abstract |
本研究では、免疫プロテアソームのβ5iサブユニットに対する特異的阻害物質を探索するために、新たにアッセイ系を構築し、薬用海洋資源ライブラリーから新規阻害物質を単離することを目標とした。さらに、これまでに構築したアッセイ系を用いて、E1、E2、E3、脱ユビキチン化酵素及びポリユビキチン化されたp53のリクルートに対する阻害物質を探索し、p53の作用を増強するがん治療薬の開発を目指す。
構成型プロテアソームは、以前、ラットの肝臓から調製した。今回、同様の方法を用いて、ラットの脾臓から免疫プロテアソームを調製した。2種類のプロテアソームにおいて、キモトリプシン様活性を評価するため発蛍光性基質を反応させ、天然資源の抽出物をスクリーニングした。今後、構成型プロテアソームよりも免疫プロテアソームをより強く阻害した抽出物から阻害物質を単離・構造決定する予定である。一方、p53の作用を増強するがん治療薬の探索のため、引続き、既に確立したアッセイ系（E1、E2、E3、脱ユビキチン化、リクルート過程）を用いて阻害物質の探索を行った。そして、海綿Stylissa massaの抽出物が脱ユビキチン化酵素USP7の作用を阻害したので化合物の精製を行い、spongiacidin Cを天然物として初めてのUSP7阻害物質として単離することができた（Bioorg. Med. Chem. Lett.）。USP7は、がん抑制遺伝子産物p53のプロテアソームによる分解を促進するHdm2（ヒトMdm2）に結合し、自己ユビキチン化したHdm2からユビキチンを除去する働きをする。したがって、USP7に対する阻害物質はp53を安定化させ、がん抑制効果を示すと考えられる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
当初予定していた免疫プロテアソーム調製とスクリーニングだけでなく、天然物として初めてのUSP7阻害物質として海綿からspongiacidin Cを単離することができたので、当初の計画以上に進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
構成型プロテアソームよりも免疫プロテアソームをより強く阻害した抽出物から阻害物質を単離・構造決定する。さらに、p53の作用を増強するがん治療薬の探索のため、引続き、既に確立したアッセイ系（E1、E2、E3、脱ユビキチン化、リクルート過程）を用いて阻害物質の探索を継続する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
３月に抗体を注文したが国内在庫がなかったので、納品が４月になることになった。そのため、次年度使用額が生じた。
４月に納品になる抗体を用いて、予定の実験を行う。
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Research Products
(26 results)
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[Journal Article] Manzamine A, a marine-derived alkaloid, inhibits accumulation of cholesterol ester in macrophages and suppresses hyperlipidemia and atherosclerosis in vivo.2013
Author(s)
K. Eguchi, Y. Fujiwara, A. Hayashida, H. Horlad, H. Kato, H. Rotinsulu, F. Losung, R. E. P. Mangindaan, N. J. de Voogd, M. Takeya, S. Tsukamoto
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Journal Title
Bioorg. Med. Chem.
Volume: 21
Pages: 3831-3838
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Spongiacidin C, a bromopyrrole alkaloid from the marine sponge Stylissa massa, functions as a USP7 inhibitor.2013
Author(s)
M. Yamaguchi, M. Miyazaki, M. P. Kodrasov, H. Rotinsulu, F. Losung, R. E. P. Mangindaan, N. J. de Voogd, H. Yokosawa, B. Nicholson, S. Tsukamoto
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Journal Title
Bioorg. Med. Chem. Lett.
Volume: 23
Pages: 3884-3886
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Siladenoserinols A-L: new sulfonated serinol derivatives from a tunicate as inhibitors of p53-Hdm2 interaction.2013
Author(s)
Y. Nakamura, H. Kato, T. Nishikawa, N. Iwasaki, Y. Suwa, H. Rotinsulu, F. Losung, W. Maarisit, R. E. P. Mangindaan, H. Morioka, H. Yokosawa, S. Tsukamoto
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Journal Title
Org. Lett.
Volume: 15
Pages: 322-325
DOI
Peer Reviewed
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