2016 Fiscal Year Annual Research Report
リボソームを介した新しい酸化ストレス応答機構の解析
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25293064
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
伊東 健 弘前大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10323289)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松宮 朋穂 弘前大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30344592)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | GCN1L1 / ATF4 / リボソーム / アミノ酸飢餓 / Nrf2 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
GCN1L1が酸化ストレス防御に果たす役割の個体レベルでの検討---昨年度の解析よりGCN1L1 KOマウスは、出生直後に肺胞虚脱のため呼吸不全により致死であることが示唆された。妊娠週齢をおって詳細に解析すると、GCN1L1 KOマウスは発育遅延が観察された。出産を遅らせることにより、一部の発育遅延はレスキューされることが示唆された。
GCN1L1が酸化ストレスを感知する分子機構の解析---GCN1L1 KO マウス由来の胎児期繊維芽細胞（MEF）を用いて解析すると、アミノ酸飢餓によるATF4の活性化はGCN1L1 KO MEFでは観察されなかったが、親電子性物質によるNrf2の活性化は野生型MEFと同程度に観察された。以上のことから、親電子性物質によるNrf2の活性化にはGCN1L1が必須ではないことが明らかになった。
eIF2a-ATF4経路とNrf2経路のクロストークが酸化ストレス応答に果たす役割の検討---４つのeIF2aを全てノックアウトした細胞にHRIを単独で発現するレスキュー細胞系を用いて調べ、カルノシン酸によるATF4の活性化にはHRIが関与することを明らかにした。さらにカルノシン酸によりNrf2とATF4が同時活性化される系を用いてNrf2とATF4の物理的相互作用により協調的に制御される遺伝子をクロマチン免疫沈降法を用いて解析することを試みたが、ATF4抗体があまり適さないこと、Nrf2とATF4の活性化にタイムラグが存在することからこの解析はうまくいかなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
GCN1L1 KOマウスにおいて産直後に致死となる原因が明らかになりつつあるがその詳細な解析が遅れている。また、GCN1L1にはミトコンドリアインバランスを感知する働きがあることが明らかになりつつあるが、レスキュー実験による確認および詳細な解析が遅れている。MEF細胞においてもこのことを確認し、早急にレスキュー実験を開始する必要がある。
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| Strategy for Future Research Activity |
GCN1L1 KOマウスにおいて、産直後に致死となる原因を明らかにすることが重要である。さらには解析が遅れているMEF細胞におけるレスキュー実験を早急に推し進める必要がある。
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| Causes of Carryover |
当該年度中に終了しなかった実験があり、その遂行のために次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度レスキュー実験などの解析に必要となる消耗品を購入予定である。
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[Journal Article] The BET bromodomain inhibitor exerts the most potent synergistic anticancer effects in combination with quinone-containing compounds and anti-microtubule drugs2016
Author(s)
Liu PY, Sokolowski N, Guo ST, Siddiqi F, Atmadibrata B, Telfer TJ, Sun Y, Zhang L, Yu D, Mccarroll J, Liu B, Yang RH, Guo XY, Tee AE, Itoh K, Wang J, Kavallaris M, Haber M, Norris MD, Cheung BB, Byrne JA, Ziegler DS, Marshall GM, Dinger ME, Codd R, Zhang XD, Liu T
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Journal Title
Oncotarget
Volume: 7
Pages: 79217-79232
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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