水痘ウイルスのAntigenic modulationによる潜伏感染の解析

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25293108
• Research Institution: University of Toyama
• Principal Investigator: 白木 公康 富山大学, 大学院医学薬学研究部(医学), 教授 (50135745)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 水痘帯状疱疹ウイルス / 潜伏感染 / 抗原変調

Outline of Annual Research Achievements

水痘感染細胞を中和活性のある抗ｇH抗体で処理することによって、感染細胞の感染性が消失する過程がほぼ明らかにできた。
感染細胞を抗体で処理すると、ウイルスの後期タンパクである糖タンパクの分布に差異は生じていないことからすべてのウイルス蛋白は転写されるが、タンパク合成は低下していく。そして、ウイルスの転写因子IE62と細胞側転写因子SP1の細胞内局在という点では、抗体処理により、IE62とSP1の散財様式が溶解感染に比べ乖離しており、これがウイルス蛋白の転写が阻害されることと一致していた。
感染細胞を抗体処理中にButhionine sulfoximine（BSO)を加えることで感染性の消失を阻止できた。これは、BSOがグルタチオン量を減少させ、H2AXのリン酸化が促進された状況を作り出すことによって、DNAをクロマチンによる修飾を阻害することにより、転写の制御に関わると考えられる。このような作用を持つBSOで処理した細胞では、ウイルス遺伝子の転写に関わるIE62とIE63産生が続くことと、IE62と転写因子SP1の格からの消失が遅れることと、BSO処理によりクロマチンの修飾を受けていない活性型のウイルスDNAが多く存在することが確認された。このことは、ウイルス遺伝子の発現のサイレンシング、線p苦感染しているウイルス遺伝子同様、感染性喪失にクロマチンとの結合が関係していることを示唆した。
以上のように、抗ｇH抗体処理により、IE62とSP1の共局在が阻害されることで、ウイルス蛋白の合成が阻害されること、また、ウイルス遺伝子へのクロマチンの付加がウイルス発現や感染性喪失に関わることが確認された。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

細胞やウイルス等の実験を中心的に実施を始めた助教の2名の退職のため、実験の進みが遅れた。

Strategy for Future Research Activity

現在、助教が補充され、准教授の後任の選考を行い新しい体制で、どの様に、ウイルスの感染性の消失が起こるかについてされに詳しい解析を推進する予定である。
長年メカニズムが不明とされた抗原変調に、ウイルス転写因子と細胞側転写因子Sp1の関係が明らかにできてたこと、感染性消失にクロマチンによる遺伝子の不活化のステップをさらに明らかにする。

Causes of Carryover

物品購入の端数が出たため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

消耗品購入に使用