終末糖化産物受容体阻害アプタマーの開発と心血管病、癌への応用

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25293127
• Research Institution: Kurume University
• Principal Investigator: 山岸 昌一 久留米大学, 医学部, 教授 (40281026)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 糖尿病合併症

Outline of Annual Research Achievements

ストレプトゾトシン糖尿病ラットに、前年度までに作成した修飾RAGEあるいはコントロールアプタマーを腹腔内に投与し、下記の項目について検討をおこなった。
1.腎機能、腎重量、血圧などに及ぼす影響を検討する（１、３、５ヶ月目）。
2.尿中微量アルブミン量、蛋白尿ならびに尿中ネフリン排泄や尿細管障害マーカー排泄に及ぼす影響を測定する（１、３、５ヶ月目）。
3.微量アルブミン尿の出現やポドサイトの障害には、酸化ストレスの産生や炎症反応が関わることが知られている。そこで、酸化ストレスマーカーである8-OHdGの尿中排泄量や腎組織におけるVEGF、MCP-1の発現をELISA法やreal-time PCRならびにwestern blotを用いて検討する（１、３ヶ月目）。
4.組織学的に糸球体硬化症や尿細管間質病変に及ぼすAGE-アプタマーの効果について検討する。合わせてポドサイトロスの程度や足突起の癒合についても形態学的な検討を加える（３、５ヶ月目）。
5.RAGE-アプタマーの投与により、組織でのAGEや RAGEの発現レベルが低下し、情報伝達を担う分子であるNADPHオキシダーゼの発現やNF-κBの活性化が抑制されているかどうかを免疫染色法、real-time PCR、western blot、酵素法などで検討する（３、５ヶ月目）。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

該当アプタマーの作製、動物モデルを用いたin vivoにおける効果の確認を予定通りおこなっている。また、次年度に行う予定の動物モデルを用いた効果の確認についても、モデル作製の準備をおこなっている。

Strategy for Future Research Activity

該当アプタマーのin vivoにおける糖尿病合併症の抑制効果について、バルーン傷害後血管リモデリングに対する効果解析と急性心筋梗塞後リモデリングへの効果解析、癌への効果解析を予定通りおこなう。

Causes of Carryover

消耗品及び試薬の使用量が若干少なかったため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

翌年度におこなう消耗品、試薬の購入に用いる。