2013 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
25293210
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
|
| Research Institution | Kyoto University |
|---|
Principal Investigator |
稲垣 暢也 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30241954)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
原田 範雄 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50530169)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
|
| Keywords | インクレチン / GIP / K細胞 / 肥満 |
|---|
| Research Abstract |
腸管内分泌K細胞の単離、回収を目的にGIP-GFP knock-in(GIP-GFP)マウスを作製し、フローサイトメーターを用いて回収したK細胞のマイクロアレイ解析を行ったところ、K細胞に特異的に高発現する転写因子regulatory factor X 6 (Rfx6)を同定した。Rfx6のK細胞での機能的な意義を検討するため、マウス腸管内分泌腫瘍株STC-1細胞を用いて解析を行った。Rfx6-knockdown STC-1細胞では、コントロールと比較してGIP mRNA発現、細胞内GIP含有量及びGIP 分泌の有意な低下を認めた。またexpression plasmidを用いたRfx6強発現下ではGIP mRNA発現量の増加を認めた。Rfx6とGIPプロモーター遺伝子を用いてone-hybrid assayを行い、GIPプロモーター上流5216～6215 bpにRfx6の結合を認めた。また、GIPプロモーター遺伝子を用いたluciferase reporter assayでは、確認したRfx6結合部位を欠損するとluciferaseの活性低下を認めたことから、同部位がGIP遺伝子活性に重要であることが明らかとなった。次にRfx6のin vivoでのK細胞における機能的意義を検討した。高脂肪食負荷GIP-GFPヘテロ(HFD)マウスは、通常食負荷GIP-GFPヘテロ(CFD)マウスに比較して有意な体重増加と経口糖負荷後のGIP分泌の増加を認めた。HFDマウスでは、CFDマウスと比較して上部小腸内のK細胞数に差を認めないが、腸管GIP含有量の有意な増加を認めた。さらに、HFDマウス小腸K細胞のGIP mRNA及びRfx6 mRNA発現量は、CFDマウス小腸K細胞に比較して有意に増加していた。以上から我々は、Rfx6がK細胞内でGIP遺伝子発現を正に調整し、高脂肪食肥満下のGIP分泌亢進に関与することを明らかにした。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
前述した成果は、論文化しすでにThe Journal of Biological Chemistryに掲載された。GIP-GFPマウスを用いたK細胞と非K細胞をマイクロアレイや半定量的PCRの結果から、GIP分泌や合成に関わるいくつかの新たな分子に注目し、機能解析を行っている。またこれまでGLP-1分泌への関与が報告されているいくつかの脂肪酸受容体に注目し、K細胞における遺伝子発現量を評価したところ、K細胞が発現する腸管部位によって腸管脂肪酸受容体の発現局在が異なることを明らかにした。
|
| Strategy for Future Research Activity |
申請者らが単離したＫ細胞に発現する新規分子(脂肪酸結合蛋白ならびにG蛋白質共役受容体)のGIP合成や分泌への関与については、マウス腸管内分泌細胞STC-1細胞を用いてin vitroで解析中である。これらの分子のうち、脂肪酸結合蛋白質については、欠損マウスを他大学との共同研究により入手し、in vivoでのK細胞におけるGIP合成や分泌能を評価中である。G蛋白質共役受容体については、K細胞における役割を評価するため、ノックアウトマウスを作製しGIP合成や分泌能を解析中である。
|
-
[Journal Article] Reduction of reactive oxygen species ameliorates metabolism-secretion coupling in islets of diabetic GK rats by suppressing lactate overproduction.2013
Author(s)
Sasaki M, Fujimoto S, Nishi Y, Mukai E, Yamano G, Sato Y, Sato H, Tahara Y, Ogura K, Nagashima K, Inagaki N.
-
Journal Title
Diabetes
Volume: 62
Pages: 1996-2003
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Transcriptional Regulatory Factor X6 (Rfx6) Increases Gastric Inhibitory Polypeptide (GIP) Expression in Enteroendocrine K-cells and Is Involved in GIP Hypersecretion in High Fat Diet-induced Obesity.2013
Author(s)
Suzuki K,Harada N,Yamane S,Nakamura Y,Sasaki K,Nasteska D,Joo E,Shibue K,Harada T,Hamasaki A,Toyoda K,Nagashima K,Inagaki N
-
Journal Title
J Biol Chem.
Volume: 288
Pages: 1929-1938
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Tetrahydrobiopterin has a glucose-lowering effect by suppressing hepatic gluconeogenesis in an endothelial nitric oxide synthase-dependent manner in diabetic mice.2013
Author(s)
Abudukadier, A., Fujita, Y., Obara, A., Ohashi, A., Fukushima, T., Sato, Y., Ogura, M., Nakamura, Y., Fujimoto, S., Hosokawa, M., Hasegawa, H., Inagaki, N
-
Journal Title
Diabetes
Volume: 62
Pages: 3033-3043
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] A new equation to estimate basal energy expenditure of patients with diabetes.2013
Author(s)
Ikeda, K., Fujimoto, S., Goto, M., Yamada, C., Hamasaki, A., Ida, M., Nagashima, K., Shide, K. Kawamura, T., and Inagaki, N.
-
Journal Title
Clin. Nutr.
Volume: 32
Pages: 777-782
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Long-term safety of linagliptin in Japanese patients with type 2 diabetes.2013
Author(s)
Araki, E., Kawamori, R., Inagaki, N., Watada, H., Hayashi, N., Horie, Y., Sarashina, A., Thiemann, S., von Eynatten, M., Woerle, H. J
-
Journal Title
Diabetes Obes. Metab.
Volume: 15
Pages: 364-371
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Enteral supplement enriched with glutamine, fiber, and oligosaccharide attenuates experimental colitis in mice.2013
Author(s)
Joo E, Yamane S, Hamasaki A ,Harada N, Matsunaga T,Muraoka A, Suzuki K, Daniela N, Fukushima T, Hayashi T, Tsuji H, Shide K, Tsuda K , Inagaki N
-
Journal Title
Nutrition
Volume: 29
Pages: 594-555
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
