2015 Fiscal Year Annual Research Report
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25293237
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
嶋 緑倫 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (30162663)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松井 英人 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (00571027)
堀田 秋津 京都大学, 学内共同利用施設等, 助教 (50578002)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | hemophilia A / gene therapy / piggyBack / transposon / factor Ⅷ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までの研究にて我々は非ウイルス性ベクターであるpiggyBack トランスポゾンベクターを用いて血友病Ａマウスモデルに第FVIII因子遺伝子を導入し３００日にわたって第VIII因子を発現することに成功した（Matsui H, et.al. PLos One 9(8) e104597, 2014）。しかしながら、ヒトへの臨床応用を考える場合、さらに、大きな動物での検討が必須であった。平成２７年度では、ハイドロダイナミック法（hydrodynamic:gene delivery:HGD）を用いて奈良医大で所有する血友病Ａイヌモデルに遺伝子を導入する実験を行った。１０－１２ｋｇの血友病イヌビーグル犬に全身麻酔下に大伏在静脈に１８Ｇの末梢カテーテルを挿入し、ガイドワイアーを用いて注入用のバルーンカテーテルを挿入した。IVR技術によりバルーンカテーテルは肝静脈分岐下に設置した。肝標的HGDはpiggyBack トランスポゾンベクターを用いて右側、右中葉、左中葉左側の、４つの肝葉で実施した。組織損傷の評価のために血液サンプルを採取した。ＧＦＰ発現の評価のためにベクター投与５および１２０日目にエコーガイド下に肝生検を実施した。ＡＳＴおよびＡＬＴの一過性の上昇がみられたが、循環、呼吸、心機能に影響は見られなかった。組織学的検査により、全４肝葉の７０－８０％の肝細胞でGFPが投与５および１２０日とも陽性であった。ＨＧＤおよびＩＶＲを併用することにより大動物モデルにおいても低侵襲的に安全かつ有効に遺伝子を導入することが確認された。次に、血友病Ａイヌモデルを用いて第VIII因子遺伝子をＨＧＤ法およびＩＶＲ法にて導入を試みる。さらに本年度は第VIII因子インヒビターが発生した軽症血友病A患者の抗原構造を明らかにした。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Presentation] Novel gene therapy strategy for hemophilia A by hydrodynamic gene delivery combined with non-viral piggyBac transposon vector in canine model2015
Author(s)
Noda M, Matsui H, Matsunari Y, Ochi S, Shima M, Fukuoka Y, Sato T, Anai H, Kichikawa K, Nakayama M, Hotta A, Sugimoto M.
Organizer
2015 Annual Meeting of the American Society of Hematology
Place of Presentation
Orlando, Florida, USA
Year and Date
2015-12-07
Int'l Joint Research
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