2014 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子不安定性の異なるサブクラス分類に有用な新規マウス大腸癌疾患モデルの確立
| Project/Area Number |
25293284
|
|---|
| Research Institution | Hiroshima University |
|---|
Principal Investigator |
檜井 孝夫 広島大学, 大学病院, 講師 (10444689)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | 大腸癌 / マウスモデル |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
(1)左側大腸癌（CIN型）モデルでの腫瘍の解析と薬効評価モデルの確立：平成2014年度までには、CPC;Apcにおける造腫瘍能と腫瘍発育経過を経時的に観察でき、既存の薬剤を投与して、薬効評価ができるモデルを確立した。そこでまずNSAIDを投与して、それによる腫瘍縮小効果を確認するとともに、それによって変化する腫瘍因子を網羅的遺伝子解析で検索をした。
(2)右側型大腸癌（MSI型）マウスで得られた大腸腫瘍の網羅的遺伝子およびプロテオーム解析（一次スクリーニング）： Apc+K-ras, Apc+TGFbetaRII, Apc+B-raf, Apc+PTEN などのマウスが作製された。それぞれ異なったphenotypeの腫瘍が発生し、マイクロダイセクションによって転写産物の発現プロファイルを網羅的遺伝子発現解析用DNAチップを用いて解析中である。得られた結果を、qPCR法やWestern blotで検証し、マウス腫瘍の病理検体で免疫組織染色を行い、網羅的解析で得られたデータの検証を行っている。
(3)新規発現誘導型Creマウス（Cre-ER）と新規左側大腸癌ダブルノックアウトモデルの作製： CDX2P-Cre-ERマウスとRosa26Rマウス（Creレポーター遺伝子マウス）を交配してできたマウスに対して、タモキシフェンによる発現誘導を確認した。現在、Apcのノックアウトマウス、CDX2P-Cre-ER;ApcloxP/loxPマウス（Apcホモ）を作製し、左側大腸での造腫瘍能を確認中である。
(4)ヒトの病理検体での検証とサブクラス分類をめざした臨床試験の構築：CDX2P-G22-Cre;Apc;K-rasダブルノックアウトマウスから浸潤能の高い腫瘍が発生した。網羅的遺伝子解析を行い、浸潤・転移能に関与する候補遺伝子や候補蛋白質を約１０種類程度まで絞り込んだ。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
（１）左側大腸癌（CIN型）モデルでの腫瘍の解析と薬効評価モデルの確立では、現在、一つの論文を投稿中である。さらに、別の論文も2015年度中には投稿可能と思われる
（２）右側型大腸癌（MSI型）マウスで得られた大腸腫瘍の網羅的遺伝子およびプロテオーム解析、についても2015年度中に論文報告が一つできる予定である。
（３）新規発現誘導型Creマウス（Cre-ER）と新規左側大腸癌ダブルノックアウトモデルの作製、についても懸案であったCre-ERマウすが順調に動いており、floxマウスも既に飼育中である。
（４）ヒトの病理検体での検証とサブクラス分類をめざした臨床試験の構築、についても既にヒトの検体の収集は進んでおり、2016年度には解析が可能となる予定である。
|
| Strategy for Future Research Activity |
（１）左側大腸癌（CIN型）モデルでの腫瘍の解析と薬効評価モデルの確立、については、現在、論文投稿中であるが、他の薬剤についての検討や、腸内細菌による腫瘍発生の変化およびシンバイオティクスなど、腸内細菌と栄養素の投与の効果について検討中であり、今後さらなる研究成果が出てくることが予想される。
（２）右側型大腸癌（MSI型）マウスで得られた大腸腫瘍の網羅的遺伝子およびプロテオーム解析、については2015年度中に論文投稿が可能な状態になる。
（３）新規発現誘導型Creマウス（Cre-ER）と新規左側大腸癌ダブルノックアウトモデルの作製、については、これまでに他のCPCマウスやCDX2P-G22Creマウスでは作製が困難であった遺伝子改変マウスの作製が進行して、さらに興味深いphenotypeの腫瘍が作製可能となる。
（４）ヒトの病理検体での検証とサブクラス分類をめざした臨床試験の構築、については、今後、ヒトの腫瘍をつかった予後との相関についての解析が進む。
|
| Causes of Carryover |
試薬の購入予定であったが、パイロット実験の結果から試薬の使用予定が2015年度に延長となったため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
2015年度中に使用予定である。
|
-
[Presentation] The generation of colorectal cancer mouse model based on microsatellite instability and the identification of transforming growth factor-beta signal target2015
Author(s)
Masashi Miguchi, Takao Hinoi, Manabu Shimomura, Tomohiro Adachi, Yasufumi Saito, Hiroaki Niitsu, Masatoshi Kochi, Yusuke Sotomaru, Hideaki Ijichi, Tsuneo Ikenoue, Kunitoshi Shigeyasu, Kohji Tanakaya, Kazuhiro Sentani, Naohide Oue, Wataru Yasui, Hideki Ohdan
Organizer
AACR 2015
Place of Presentation
Philadelphia, USA
Year and Date
2015-04-18 – 2015-04-22
-
[Presentation] Impact of synbiotics administration on tumorigenesis of colon cancer mouse model2015
Author(s)
Yasufumi Saito, Takao Hinoi, Tomohiro Adachi, Manabu Shimomura, Masashi Miguchi, Hiroaki Niitsu, Masatishi Kochi, Hideki Ohdan, Kazuhiro Sentani, Naohide Oue, Wataru Yasui
Organizer
AACR 2015
Place of Presentation
Philadelphia, USA
Year and Date
2015-04-18 – 2015-04-22
-
[Presentation] Gene expression profiling for oncogenic Kras mutation in mice and human colorectal cancer2015
Author(s)
Hiroaki Niitsu, Takao Hinoi, Yasuo Kawaguchi, Kazuhiro Sentani, Naohide Oue, Yusuke Sotomaru, Tomohiro Adachi, Yasufumi Saito, Masashi Miguchi, Masatoshi Kochi, Manabu Shimomura, Wataru Yasui, and Hideki Ohdan
Organizer
AACR 2015
Place of Presentation
Philadelphia, USA
Year and Date
2015-04-18 – 2015-04-22
-
-
-
[Presentation] Sulindac delayed and suppressed the tumor progression, was not effective on inhibition of tumor initiation in a human colorectal cancer mouse model (CPC;Apc mouse).2014
Author(s)
Tomohiro Adachi, Takao Hinoi, Naohide Oue, Yusuke Sotomaru,Yasufumi Saito, Masashi Miguchi,Hiroaki Niitsu, Masatoshi Kochi, Manabu Shimomura, Wataru Yasui, and Hideki Ohdan
Organizer
AACR 2014
Place of Presentation
SanDiego, USA
Year and Date
2014-04-05 – 2014-04-09
-
-
