2013 Fiscal Year Research-status Report
最適電気刺激条件による褥瘡の加速的治療に関する研究
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25350649
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kobe Gakuin University |
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Principal Investigator |
杉元 雅晴 神戸学院大学, 総合リハビリテーション学部, 教授 (20379457)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
寺師 浩人 神戸大学, 医学部附属病院, 教授 (80217421)
前重 伯壮 神戸大学, 保健学研究科, 助教 (90617838)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ヒト皮膚由来線維芽細胞 / 細胞の増殖 / 周波数 |
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| Research Abstract |
研究目的；褥瘡に対する電気刺激療法は，推奨度がBランク（創の縮小）であるが，統一した刺激条件はなく，最適な刺激条件の究明が必要である．これまでに確認した線維芽細胞の遊走における最適刺激強度200μAで，細胞分裂に最適な周波数の検証を行った．
方法；細胞はヒト皮膚由来線維芽細胞の7-8 継代を用いた．培地は10% FBS 含有D-MEMにて行った．播種条件は60mm dishに細胞数を20×10000 cellsの濃度で播種した．電気刺激は直流微弱パルス電流刺激（直流電流刺激）を用いて，刺激強度0μA（コントロール群），周波数2Hz，パルス幅250msec，刺激強度200μA（2Hz群）および周波数64Hz，パルス幅8msec，刺激強度200μA（64Hz群）の３条件とした．電極は白金電極を使用し，専用刺激装置（試作品）を用いて直流電流刺激を行った．撮影はタイムラプス顕微鏡（OLYMPUS）を用いて，60mm dishの中央，電極周辺を1時間ごとに72時間撮影を行った．
結果；3条件における死細胞数に差はみられなかった．72時間後，60 mm dish内の細胞数についてはコントロール群，64Hz群と比較し，2Hz群で細胞数が多く確認された．線維芽細胞に対する直流電流刺激では，2Hz群において細胞の増殖が確認され，64Hzではコントロール群と差がみられなかった．褥瘡治療に使用した周波数2Hz，パルス幅250msecでは創の縮小が得られており，臨床研究でも有効な周波数の1つであることが確認できた．
線維芽細胞に対する直流電流刺激はコントロール群，64Hz群に比較し，2Hz群で細胞の増殖が確認された．今後，それ以外での周波数も検討することで，細胞の増殖に最適な周波数が確認できると考えられる．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度から新しい実験環境下で始めたので、環境整備に時間を要した。
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| Strategy for Future Research Activity |
60mm dishに細胞数を20×10000 cellsの濃度で播種したヒト皮膚由来線維芽細胞（7-8 継代）を用いて，電極は白金電極を使用し，直流微弱パルス電流刺激装置により，コントロール群，周波数1Hz（パルス幅250msec）群，周波数4 Hz（パルス幅250msec）群を追加し，3条件で細胞増殖にとって最適周波数帯を絞りこみ、最適刺激周波数を確認する．
その後、最適周波数において，パルス幅を250msec，125msec，64msec,32msec，16msec，8msecに調節し，最適パルス幅を確認する。撮影はタイムラプス顕微鏡（OLYMPUS）を用いて，60mm dishの中央，電極周辺を1時間ごとに72時間撮影を行う．
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
実験環境整備に時間がかかり、研究開始が遅れた。
今までの遅れを挽回し、次年度の研究進行を取り戻すよう精力的に行動する。
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