2015 Fiscal Year Annual Research Report
不可逆的な酵素阻害剤評価用バイオセンサの開発と薬剤スクリーニングへの応用
| Project/Area Number |
25420841
|
|---|
| Research Institution | Kanagawa Institute of Technology |
|---|
Principal Investigator |
飯田 泰広 神奈川工科大学, 応用バイオ科学部, 教授 (40329305)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
|
| Keywords | β-セクレターゼ / 固定化酵素 / β-セクレターゼ阻害剤 / スクリーニング |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
アルツハイマー病は認知症の一種であり、脳が次第に萎縮し、記憶障害や実行機能障害などが起こり、ついには死に至る病である。国内に約200万人以上もいる認知症者の約6割がアルツハイマー病であるとされ、今後も増加し続けることが予測されているため、この対策は社会的に重要である。現在、治療薬の開発が精力的に進められてきているが、十分効果のあるものは開発されておらず、また、根治的な療法は皆無である。
本研究では、アルツハイマー病の原因となるアミロイド線維を形成するのに鍵となる酵素の阻害剤を見出すためのツールを開発し、実際にスクリーニングを行い、リード化合物を得ることを目標としている。特に、通常開発される酵素阻害剤が基質のアナログを対象とすることが多く、可逆的阻害であることに対し、本研究では、固定化酵素と組み合わせることにより不可逆的に阻害できる化合物を容易に評価できるシステムを開発することにより従来にないタイプの阻害剤スクリーニングを行うことを特徴としている。
具体的には、本研究において、ストレプトアビジンと組換えβ-セクレターゼを融合させたタンパク質を作製することにより、配向性を持たせて固定化することを可能とし、マイクロフローデバイスでの検出感度の向上に取り組んだ。また、CFP（青色蛍光タンパク質）とYFP（黄色蛍光タンパク質）をβ-セクレターゼの認識配列でつないだ新規β-セクレターゼのFRET基質を開発した。当該基質は従来の認識配列に蛍光色素を結合させたものと異なり、生体内ですべて合成させることが可能であるため、安価でかつin vivoでの計測に有用であると考えられる。更に、新規化合物および生薬抽出物に対してβ-セクレターゼ阻害能スクリーニングを行い、阻害活性を有する物質及び生薬を見出すことができた。
|
