2014 Fiscal Year Research-status Report

血中低分子核酸を指標にした腎細胞癌新規腫瘍マーカーの開発

Research Project

Project/Area Number	25430137
Research Institution	Kagoshima University
Principal Investigator	鑪野秀一鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (30624655)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小島聡子帝京大学, 医学部, 准教授 (10345019) 関直彦千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50345013) 榎田英樹鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (80347103) 中川昌之鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (90164144)
Project Period (FY)	2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords	マイクロRNA / 腎細胞癌
Outline of Annual Research Achievements	本研究は、腎細胞癌患者で発現が亢進しているmiRNAを指標にして、血液中を循環しているmiRNAを検出し、腎癌の腫瘍マーカーとしての有効性を検討することを目標としている。腎癌マイクロRNA発現プロファイルの中でmiR-23b/27bクラスターmiRNAに着目し、その機能解析と標的遺伝子の探索を行った。腎細胞癌（淡明細胞癌）61検体と正常腎組織61検体においてmiR-23b/27bの発現を測定した。また臨床病理学的所見や予後と、miR-23b/27bの発現の関連について解析を行った。miR-23b, miR-27b導入腎癌細胞株を用いて細胞機能解析を行った。in silico解析にてmiR-23b/27bの標的遺伝子の探索を行った。miR-23b/27bの発現は、正常腎に比べ、癌組織で有意に低下していた（P < 0.0001, P < 0.0001）。深達度がpT3以上であった群はpT2以下であった群に比べ（P = 0.0241, P = 0.0241）、異型度（grade）がG3の群ではG2以下の群に比べ（P = 0.0233, P = 0.0233）、それぞれmiR-23b/27bの発現が有意に低値であった。miR-23b/27bの発現が高値であった群は低値であった群に比べ、有意な全生存期間の延長が認められた（P = 0.0183, P = 0.0253）。miR-23b, miR-27bを腎癌細胞株に核酸導入すると、増殖・遊走・浸潤能の抑制効果を認めた。in silico解析にてmiR-23b, miR-27bは、いずれもcytokine-cytokine receptor interaction pathwayに属する遺伝子群に強く関与することが明らかとなった。このpathwayに含まれるmiR-23b, miR-27bの共通の標的候補遺伝子には、EGFR・METなどのがん遺伝子が含まれていた。miR-23b/27bクラスターは、腎細胞癌で発現が抑制されており、癌抑制的microRNAとして機能することが示唆された。また、これらのmicroRNAの発現測定は腎細胞癌予後予測因子としての腫瘍マーカーとして有用である可能性が示された。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 腎癌細胞におけるマイクロRNA発現プロファイルから癌抑制microRNAを見出し、論文化することができた。
Strategy for Future Research Activity	miRNA-mRNAの分子ネットワークから低酸素環境下で浸潤・転移に関わる標的分子を選択し、低酸素下腎癌の新たなシグナル伝達を明らかにすることで、活性化されているシグナル伝達を遮断するマイクロRNAを選別している。さらに研究を進めることで他の有用なmicroRNAを探索するとともに、腎癌患者の血液におけるmicroRNAの測定を検討している。
Causes of Carryover	実験全体は順調に進んでいるが、当該実験の結果の検証作業のため次年度への繰越が必要となった。
Expenditure Plan for Carryover Budget	繰越金は物品費・その他の支出に充てられる。