2015 Fiscal Year Annual Research Report
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25430140
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
高 ひかり 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60338374)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤村 務 東北薬科大学, 薬学部, 教授 (70245778)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 膀胱癌 / 尿中腫瘍マーカー / 糖タンパク質 / 糖鎖修飾ペプチド抗体 / ELISA / ストレプトアビジンーフィコエリスリン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
膀胱癌は泌尿器系悪性腫瘍の中では前立腺癌に次いで多い癌であるが、前立腺癌におけるPSAのような有効なスクリーニングマーカーがない。しかし、膀胱癌の予後は依然として悪く早期発見・診断が強く望まれる。現在、膀胱癌マーカーとして最も有効性が高いといわれている尿中NMP22は尿路感染症で偽陽性率が高い。我々は、膀胱癌の早期発見につながる患者への負担が少ない尿中腫瘍マーカーの探索を行った結果、候補と成り得る糖タンパク質を見つけた。この糖タンパク質から糖鎖修飾ペプチドを抗原とする抗体を作製し、膀胱癌の早期発見・診断につながる尿中腫瘍マーカーとしての有効性を評価した。
膀胱癌患者尿から見つけた糖タンパク質X及びYのタンパク質に対する抗体（市販品）と作製した糖ペプチド抗体を用いた多項目同時測定系の構築を図った。サンドイッチELISA法により健常者と癌患者由来の尿を比較し、特異性と感度の評価を行った。一次抗体にタンパク質に対する市販品の抗体X及びYを用い尿中のタンパク質X及びYをキャプチャーした。その後、二次抗体としてビオチン標識糖鎖修飾ペプチド（糖ペプチドX及びY）抗体を結合させ、ストレプトアビジン-フィコエリスリン(PE)で蛍光ラベルした。この方法により、尿中の糖タンパク質X及びYの糖鎖修飾ペプチド量を同時に測定することが可能となり、従来のELISA法に比べ試料量や測定時間を短縮することができた。膀胱癌患者の悪性度のGradeが進行する程に蛍光強度が増加した。特に、75kDaの糖タンパク質 Xで顕著であり、膀胱癌患者由来の尿と健常人由来の尿を優位に区別することが可能であった。試料量は尿10～100ulで検出可能であることから、感度は十分であった。糖タンパク質X及びYの糖鎖を同時に測定することにより膀胱癌患者由来の尿と健常人由来の尿を優位に区別することが可能であり、NMP22を補完できる診断法の可能性を示した。
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[Journal Article] Absence of Elovl6 attenuates steatohepatitis but promotes gallstone formation in a lithogenic diet-fed Ldlr(-/-) mouse model.2015
Author(s)
Kuba M, Matsuzaka T, Matsumori R, Saito R, Kaga N, Taka H, Ikehata K, Okada N, Kikuchi T, Ohno H, Han SI, Takeuchi Y, Kobayashi K, Iwasaki H, Yatoh S, Suzuki H, Sone H, Yahagi N, Arakawa Y, Fujimura T, Nakagawa Y, Yamada N, Shimano H.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 5
Pages: 17604
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Effects of sitagliptin on ectopic fat contents and glucose metabolism in type 2 diabetic patients with fatty liver: A pilot study.2015
Author(s)
Watanabe T, Tamura Y, Kakehi S, Funayama T, Gastaldelli A, Takeno K, Kawaguchi M, Yamamoto R, Sato F, Ikeda S, Taka H, Fujimura T, Fujitani Y, Kawamori R, Watada H.
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Journal Title
Journal of Diabetes Investigation
Volume: 6
Pages: 164-172
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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