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2014 Fiscal Year Annual Research Report

部位特異的組換えにおけるドナー選択制御機構の解析

Research Project

Project/Area Number 25440005
Research InstitutionTokyo Institute of Technology

Principal Investigator

筒井 康博  東京工業大学, 生命理工学研究科, 助教 (00390625)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2015-03-31
Keywords相同組換え / 分裂酵母 / 接合型変換
Outline of Annual Research Achievements

相同組換えは、生物種多様性に寄与する一方で、DNA損傷に対する修復に働きゲノム安定性維持に深く関わる。分裂酵母のホモタリックな野生型株(h90)において、相同組換え機構は接合型変換にも働く。分裂酵母の接合型には、Plus(P)とMinus(M)があり、mat1遺伝子座に入る遺伝情報によって決定されている。接合型変換は、mat1遺伝子座とサイレントなドナー遺伝子座(mat2Pもしくはmat3M)との間で起こり、前者がレシピエント、後者の片方がドナーとなる一方向性の遺伝子変換である。この際、上記2つの遺伝子座がドナー候補となるが、その選択は細胞の接合型(つまり、mat1座に入っている遺伝情報)により厳密に制御されており、この制御によって、P→M、M→Pへの効率的な変換が保障されている。これまでに、Class Ibグループに分類されるSwi2、Swi5、Swi6の少なくとも3種がドナー選択制御に働くことが示唆されているが、ドナー制御機構の全体像は未だ不明な点が多く残されている。これまでの知見から、未だ同定されていないClass Ib因子が存在することが予想されたため、本研究では、分裂酵母破壊株ライブラリーを用いてClass Ib因子のスクリーニング、及び、得られた候補因子の機能解析を計画した。
破壊株ライブラリーがh+株(h90派生型で、接合型変換は起こらないが、カセット間の組換えは起こる)バックグラウンドで作製されたものであるため、当初の計画では、これを利用してスクリーニングを行なう予定であった。しかしながら、前年度の計画実施の初期段階でh90株でスクリーニングを行なった方が厳密性が高いことが判明したため、掛け合わせによって全ての破壊株のh90株を作製し、スクリーニングすることとした。今年度は、約1000株の構築とスクリーニングを実施し、約20種類の候補因子を同定した。

  • Research Products

    (5 results)

All 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] Multiple regulation of Rad51-mediated homologous recombination by fission yeast Fbh1.2014

    • Author(s)
      Tsutsui Y, Kurokawa Y, Ito K, Siddique MSP, Kawano Y, Yamao F and H Iwasaki
    • Journal Title

      PLoS Genetics

      Volume: 10 Pages: e1004542

    • DOI

      10.1371/journal.pgen.1004542

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] Fbh1 versatilely regulates Rad51-mediated homologous recombination in fission yeast2014

    • Author(s)
      Yasuhiro Tsutsui, Kentaro Ito, Yumiko Kurokawa and Hiroshi Iwasaki
    • Organizer
      9th 3R Sumposium
    • Place of Presentation
      静岡県御殿場市
    • Year and Date
      2014-11-17 – 2014-11-21
  • [Presentation] 分裂酵母Fボックスヘリカーゼによる相同組換えの多面的制御機構2014

    • Author(s)
      筒井康博、黒川裕美子、伊藤健太郎、川野由美子、 山尾文明、岩﨑博史
    • Organizer
      第87回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      京都府京都市
    • Year and Date
      2014-10-15 – 2014-10-18
  • [Presentation] Fission yeast Fbh1 regulates Rad51-mediated homologous recombination2014

    • Author(s)
      Yasuhiro Tsutsui, Kentaro Ito, Yumiko Kurokawa and Hiroshi Iwasaki
    • Organizer
      4th RecA meeting
    • Place of Presentation
      Gyeongsan, Republic of Korea
    • Year and Date
      2014-10-05 – 2014-10-08
  • [Presentation] 分裂酵母Fbh1ヘリカーゼによるRad51リコンビナーゼ制御機構の解析2014

    • Author(s)
      筒井康博、伊藤健太郎、黒川裕美子、岩﨑博史
    • Organizer
      第86回遺伝学会
    • Place of Presentation
      滋賀県長浜市
    • Year and Date
      2014-09-17 – 2014-09-19

URL: 

Published: 2016-06-01  

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