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2013 Fiscal Year Research-status Report

生体機能指向性エレクトリックノーズを作製し、匂いコードモデルを検証する

Research Project

Project/Area Number 25440164
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Research InstitutionMuroran Institute of Technology

Principal Investigator

岩佐 達郎  室蘭工業大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (00133926)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
Keywordsリポカリン / 部位特異的変異導入 / 表面弾性波 / Chemosensory Protein
Research Abstract

匂いセンサー素子として利用するCp-Lip1と2タンパク質について生理的機能に関する研究を行った.まず、共焦点レーザー顕微鏡の資料台に還流チャンバーを設置し、嗅組織切片の匂い応答のカルシウムイメージングを試み、時間応答測定の可能な系を構築できた.嗅上皮切片を10 mMの匂い分子溶液で刺激したところカルシウム応答が見られた.しかし、低濃度(1 mM)では応答は見られなかった.そこに、Cp-Lip1 タンパク質(10 uM)を共存させると、カルシウム応答の認められなかった低濃度の匂い分子溶液にもカルシウム応答を示すようになった。これはCp-Lip1タンパク質が匂い応答の感度を高めていることを示唆する結果である.
種々の匂い分子結合特性を持つ匂いセンサー素子を作製するために、Cp-Lip1タンパク質のバレル内腔部分(A74, T76)および、その入り口部分(T86, M87, Q125, N126)に変異を導入し、匂い分子結合特性の変化を測定した.その結果、これらの変異体において匂い分子結合特性の変化が認められ、匂い分子結合特性の異なるセンサータンパク質素子の作製に成功したと言える.しかし、結合させたい分子種にあった変異の導入(分子デザイン)を行うまでには、更にリポカリンタンパク質と匂い分子の結合様式についての知見が必要である.
表面弾性波(Saw)デバイスを作成し、Cp-Lip1タンパク質と bis-ANSの相互作用を検出できることを示した。これによりSawデバイスを用いたセンサーデバイスの作製は可能であることが示された.しかし、Sawデバイスからの信号を取り込み解析するためには信号取り出し用装置を付け加える必要のあることが分かった.
匂いセンサー素子候補タンパク質として、アリの CSP7 (Chemosensory Protein 7)タンパク質遺伝子の発現・精製系を構築した.

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

「タンパク質匂いセンサー素子」の作製については、目的とした「異なる匂い分子結合特性を持つ」10種類の変異体を作製でき、おおむね順調に進んでいる.しかし、センサーデバイスでは計画にあったナノゲート電極電界効果トランジスター(FET)の作製が遅れ、本年度は表面弾性波(Saw)デバイスで研究を行った.また、多変量解析を行うには現存のSawデバイスシステムから信号取り出し装置を増設する必要のあることが分かり、対応中である.

Strategy for Future Research Activity

「タンパク質匂いセンサー」素子作製については現状の研究を推進する.また新たなセンサー素子候補として、アリのCSPタンパク質についても研究を進める.CSPタンパク質は匂い分子結合特性がCp-Lipとは大きく異なり、また、大量発現が容易であることから、生物物理学的研究の進展が期待できる.
センサーデバイスについては、表面弾性波(Saw)デバイスをメインに研究を進め、遅れていたFETについても研究を開始する.まず表面弾性波(Saw)デバイスで、信号を取り出し多変量解析を開始したい.

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

ほぼ計画通りに使用したが、次年度への繰り越しが可能なので、無理に残金をゼロにすることはしなかった.
2014年度には当初予想していた以外にSawデバイスの信号取り出し装置等が必要になるので、物品費が予定より多く必要と見込まれる.そこに組み込んで合わせて使用する予定である.

  • Research Products

    (12 results)

All 2014 2013 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (5 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] 縦波表面弾性波を用いた液相系センサーの動作特性2014

    • Author(s)
      小川健吾、山田真也、鳥越俊彦、澤田研、岩佐達郎、杉山史一、夛田芳宏、上杉克弘、福田永
    • Journal Title

      表面科学

      Volume: in press Pages: in press

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] イモリ嗅上皮に発現する「匂い分子結合タンパク質」のシステイン残基の働き2013

    • Author(s)
      李興、大塚淳哉、澤田研、福田永、夛田芳宏、岩佐達郎
    • Journal Title

      日本味と匂学会誌

      Volume: 20巻3号 Pages: 351-354

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 匂い分子結合タンパク質Cp-Lip1のバレル内腔に存在するアミノ酸残基の匂い分子結合に関わる役割2013

    • Author(s)
      杉浦康裕、鳥井綾乃、杉本弘文、岩佐達郎、福田永、澤田研
    • Journal Title

      日本味と匂学会誌

      Volume: 20巻3号 Pages: 359-362

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 匂い分子結合タンパク質Cp-Lip1のバレル構造の入り口付近に存在するアミノ酸残基の匂い分子結合に関わる役割2013

    • Author(s)
      鈴木里奈、杉浦康裕、鳥井綾乃、杉本弘文、岩佐達郎、福田永、澤田研
    • Journal Title

      日本味と匂学会誌

      Volume: 20巻3号 Pages: 355-358

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Isolation and genetic characterization of phenol-degradating bacterium from a salt lake in Inner Mongolia2013

    • Author(s)
      Gang Dai, Lamei Liu, Quingchao Ouyang, Chaoluomeng, Tatsuo Iwasa
    • Journal Title

      Advanced Materials Research

      Volume: 726-731 Pages: 396-400

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cp-Lip1タンパク質の有無による嗅神経細胞の匂い応答の違い2013

    • Author(s)
      杉本弘文、杉浦康裕、福田永、岩佐達郎、澤田研
    • Journal Title

      日本味と匂学会誌

      Volume: 20巻3号 Pages: 373-376

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Highly Sensitive Analysis of Water-insoluble Nanoparticles and Soluble Protein in Liquid by Resonant Surface Acoustic Wave Modulation Measurement2013

    • Author(s)
      K. Ogawa, T.Abe, Y. Seino, T. Torigoe, Y. Tada, K. Uesugi, H. Fukuda, K. Sawada, T. Iwasa,
    • Organizer
      26th International Microprocess and Nanotechnology Conference
    • Place of Presentation
      Sapporo, Royton Sapporo
    • Year and Date
      20131105-20131108
  • [Presentation] Structural and Functional Analysis of the Role of Cysteine Residue in Cp-Lip2,Lipocalin-type Protein Found in the Olfactory Epithelium of Cynops Pyrrhogaster2013

    • Author(s)
      Xing Li,Junya Otsuka,Tatsuo Iwasa
    • Organizer
      日本生物工学会
    • Place of Presentation
      広島市・広島国際会議場
    • Year and Date
      20130918-20130920
  • [Presentation] イモリ嗅上皮に発現する「匂い分子結合タンパク質」のシステイン残基の働き2013

    • Author(s)
      李興、大塚淳哉、澤田研、福田永、夛田芳宏、岩佐達郎
    • Organizer
      日本味と匂学会
    • Place of Presentation
      仙台市・仙台市民会館
    • Year and Date
      20130904-20130908
  • [Presentation] Cp-Lip1タンパク質の有無による嗅神経細胞の匂い応答の違い2013

    • Author(s)
      杉本弘文、杉浦康裕、福田永、岩佐達郎、澤田研
    • Organizer
      日本味と匂学会
    • Place of Presentation
      仙台市・仙台市民会館
    • Year and Date
      20130904-20130908
  • [Presentation] Study on the perireceptor protein (PRP) as the Sensor Element of a bioinspired erectricnose

    • Author(s)
      Xing Li, Wendurige, Tatsuo Iwasa
    • Organizer
      Joint Seminar on Environmental Science and Disaster Mitigation Research 2013 (JSED2013)
    • Place of Presentation
      Muroran, Muroran Institute of Technology
  • [Remarks] 室蘭工業大学 研究者データベース 岩佐達郎

    • URL

      http://rd-soran.muroran-it.ac.jp/profile/ja.bi-P2c-xF-qtUJ6y55V67Q==.html

URL: 

Published: 2015-05-28  

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