2014 Fiscal Year Research-status Report
種々の病因となるプロリン特異性ペプチダーゼ類に対する新規阻害剤の研究
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25450138
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| Research Institution | Setsunan University |
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Principal Investigator |
芳本 忠 摂南大学, 理工学部, 教授 (60088870)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
米山 雅紀 摂南大学, 薬学部, 講師 (00411710)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 歯周病 / 阻害剤 / 米ぬか |
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| Outline of Annual Research Achievements |
種々の病因となるプロリンに特異性ペプチダーゼの阻害剤を開発し治療や予防に役立てようとするものである。本年は歯周病菌P. gingivalisの持つプロリルトリペプチジルペプチダーゼ（ＰＴＰ）が歯肉のコラーゲンを分解することから、ＰＴＰの阻害剤を天然物にスクリーニングした。その結果、エノキタケに見出し、タンパク質を精製してその性質を明らかにした。この結果を生物工学会で発表した。しかし、エノキタケには溶血因子が存在し、安全性に問題があることが明らかになった。
そこで、更にスクリーニングを続け、米ぬかに強いＰＴＰ阻害活性を見出した。米ぬかは食用としての長い歴史から安全性がある。米ぬかからＰＴＰ阻害剤を精製し、アミノ酸配列を質量分析器で明らかにした。稲データベースの検索から24ｋＤａのタンパク質（スーパーオキシドデスムターゼ）であることを明らかにした。更に、遺伝子を化学合成し、大腸菌で発現し、酵素阻害活性があることを確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
米ぬかに歯周病予防タンパク質を見出した。このタンパク質を精製し、アミノ酸配列を決め、稲のデータベースから24ｋＤａのタンパク質であることを明らかにした。この塩基配列をもとに、ＤＮＡを化学合成し、大腸菌で発現し、ＰＴＰに特異的阻害剤であることを明らかにした。このように、目的を達成することができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
歯周病菌の病因となっているプロリルトリペプチジルペプチダーゼの阻害剤として、米ぬかから見出した24kDaのタンパク質を今後大量生産し、阻害剤の立体構造をＸ線結晶解析で明らかにする。また、酵素-阻害剤複合体の構造解析も行う。
一方、阻害剤が歯周病予防効果をP. gingivalisの増殖への影響で調べる。
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| Causes of Carryover |
歯周病菌の持つプロリルトリペプチジルペプチダーゼに対する米ぬかの阻害率を測定できたので、実験動物を用いた薬理効果の研究が必要なくなったことによる。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
周病菌の持つプロリルトリペプチジルペプチダーゼに対する米ぬかの阻害率を測定できることから、阻害率測定のために有効使用する。
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