2014 Fiscal Year Research-status Report
| Project/Area Number |
25450181
|
|---|
| Research Institution | Tokyo University of Agriculture |
|---|
Principal Investigator |
小林 謙一 東京農業大学, 応用生物科学部, 助教 (80434009)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
|
| Keywords | ポリフェノール / オリーブ葉 / 蛍光標識 / CLEM法 / 機能性食品 / オレウロペイン / ヒドロキシチロソール / 大腸癌 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、機能性食品成分の中でオリーブ葉ポリフェノールであるオレウロペインおよびその代謝産物であるヒドロキシチロソールを蛍光標識化し、その大腸癌細胞内での挙動を光学―電子線相関顕微観察法（以下CLEM法）で、詳細に観察できるようにするとともに、これらの成分の新たな機能性を明らかにしようとするものである。平成25年度には、ヒドロキシチロソールのフルオロセイン-4-イソチオシアネート（FITC）による蛍光標識化に着手し、それに成功した。平成26年度は、研究実施計画に基づき、以下の検討を実施した。
まず第1に、オレウロペインおよびヒドロキシチロソールが、大腸癌モデル細胞であるCaco-2細胞の細胞死を誘導するメカニズムについての検討を行った。
その結果、オートファジーの誘導が関与している可能性が示唆された。今後は、詳細な機能についての検討を実施していく予定である。
第2に、FITC-ヒドロキシチロソールの細胞内動態についての検討を行った。具体的には、Caco-2細胞にFITC-ヒドロキシチロソールで処理後、細胞内小器官マーカーで染色した後に、固定処理を行い、共焦点レーザー顕微鏡で観察を行った。
その結果、このFITC-ヒドロキシチロソールは、細胞内に取り込まれること、また細胞内において、核やミトコンドリアには局在せず、リソソームに一部局在することが示唆された。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成26年度の実施計画で記載した項目については、そのすべてを実施して、ほぼ目標通りの結果を得ることができた。特に、FITC-ヒドロキシチロソールを用いた実験系が確立されたことは、今後の研究に大きな進展となったと判断している。
|
| Strategy for Future Research Activity |
本年度の成果を踏まえて、平成27年度は、動的解析を実施する為に、生細胞イメージングを行っていくと同時にCLEM法を実施していく予定である。また、本年度が最終年度であるために、早期の論文化を目指す。
|
| Causes of Carryover |
実験にあたって、効率的な予算執行ができたため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
培養細胞関連試薬を購入するとともに、顕微鏡関連消耗品の購入に充てる。
|
-
-
-
-
-
[Presentation] インスリンシグナルを制御する新規化合物の探索2014
Author(s)
田中 友理, 中山 佳織, 高杉 実里, 大久保 由香, 根橋 里, 大沼 鈴奈, 吉沼 咲枝, 菅原 二三男, 竹本 健二, 紙透 伸治, 鈴木 司, 小林 謙一, 山本 祐司
Organizer
第37回日本分子生物学会年会
Place of Presentation
パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
Year and Date
2014-11-25 – 2014-11-27
-
-
-
-
[Presentation] トリプトファン代謝の代謝産物であるキノリン酸が赤血球産生機構に及ぼす影響2014
Author(s)
後藤 圭太, 伊勢 瑛, 武藤 真悠, 瀬崎 沙織, 宮原 麻美, 松本 雄宇, 武井 史郎, 福岡 伸一, 佐々木 隆造, 柴田 克己, 鈴木 司, 小林 謙一, 山本 祐司
Organizer
第87回日本生化学会大会
Place of Presentation
京都国際会議場（京都府京都市）
Year and Date
2014-10-18
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] Renal accumulation of Quinolinic Acid induces renal fibrosis and decreases erythropoietin expression.2014
Author(s)
Keita Goto, Akira Ise, Saori Sezaki, Asami Miyahara, Yu Matsumoto, Shiro Takei, Shin-Ichi Fukuoka, Ryuzo Sasaki, Katsumi Shibata, Yuji Yamamoto, Ken-Ichi Kobayashi
Organizer
14th Asian Pacific Congress of Nephrology （APCN2014）
Place of Presentation
品川プリンスホテル（東京都港区）
Year and Date
2014-05-15
-
-
-
[Presentation] Imaging of Fluorescently labeled Olive Polyphenol Hydroxytyrosol in Caco-2 Cells2014
Author(s)
Ken-Ichi Kobayashi, Yuki Mogi, Fumika Saito, Takahiro Shiga, Shiro Takei, Minh Huynh, Delfine Cheng, Tsukasa Suzuki, Filip Braet, Yuji Yamamoto
Organizer
Focus om Microscopy 2014 27th International Conference on 3D Image Processing in Microscopy
Place of Presentation
The University of Sydney (Austlalia, Sydney)
Year and Date
2014-04-13 – 2014-04-16
Invited
