2015 Fiscal Year Annual Research Report
GPCRの、バイアスを含むシグナル制御機構の構造生物学的解明
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25460033
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
上田 卓見 東京大学, 薬学研究科(研究院), 助教 (20451859)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
嶋田 一夫 東京大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (70196476)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 構造生物学 / NMR / GPCR |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度までに、rHDLの脂質二重膜に再構成したb2アドレナリン受容体が、Gタンパク質活性化能を保持していること、GRK2によるリン酸化を受けること、および被リン酸化残基数がリガンドにより異なることを確認していた。さらに、昆虫細胞発現系において重水素化とメチオニン残基のメチル基の選択標識を両方施す手法を開発した上で、rHDLの脂質二重膜に再構成したb2アドレナリン受容体のNMRスペクトルを取得して、活性型の割合および不活性型と活性型の交換速度がミセル中とは異なることを示していた (Kofuku et al., Angew. Chem. Int. Ed., 2014)。2015年度は、重水素化とメチオニン残基メチル基の選択標識を両方施したb2アドレナリン受容体を調製して、完全アゴニストおよびアレスチンシグナルを選択的に活性化することが報告されているリガンドが結合した状態におけるNMRスペクトルを測定した。その結果、アレスチンシグナルを選択的に活性化するリガンドが結合した状態において、M82およびM211の化学シフトが、通常のリガンドが結合した時とは有意に異なっており、化学シフトとシグナル選択性が相関していた。以上の結果から、b2アドレナリン受容体が複数の活性型の平衡状態にあり、カルベジロール結合時にはアレスチンシグナルをより強く活性化するコンフォメーションの割合が高くなることが示唆された。
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[Journal Article] Conductance of P2X4 receptor is determined by conformational equilibrium in the transmembrane region2016
Author(s)
Minato Y, Suzuki S , Hara T, Kofuku Y, Kasuya G, Fujiwara Y, Igarashi S, Suzuki E, Nureki O, Hattori M, Ueda T, Shimada I
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Journal Title
Proc. Natl. Acad. Sci.
Volume: 発行中
Pages: 発行中
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Identification of a Conformational Equilibrium That Determines the Efficacy and Functional Selectivity of the μ-Opioid Receptor2015
Author(s)
Okude J, Ueda T, Kofuku Y, Sato M, Nobuyama N, Kondo K, Shiraishi Y, Mizumura T, Onishi K, Natsume M, Maeda M, Tsujishita H, Kuranaga T, Inoue M, Shimada I
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Journal Title
Angew. Chem. Int. Ed.
Volume: 54
Pages: 15571-15576
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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