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2014 Fiscal Year Research-status Report

選択的分離手法を駆使した抗体医薬の体内動態解析法の開発と臨床分析への展開

Research Project

Project/Area Number 25460040
Research InstitutionUniversity of Shizuoka

Principal Investigator

轟木 堅一郎  静岡県立大学, 薬学部, 准教授 (70341451)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 林 秀樹  岐阜薬科大学, 薬学部, 准教授 (00419665)
Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords抗体医薬 / HPLC分析 / 血中薬物濃度分析
Outline of Annual Research Achievements

本年度はイムノアフィニティー精製-高温逆相LC法による抗体医薬品の血漿薬物濃度分析法開発を実施した。この方法では,特異的抗体を修飾したアフィニティー担体により,IgGが多量に存在する血液試料の中から抗体医薬のみを選択的に捕集する。捕集した抗体医薬を,IgGに対して高い分離と感度が期待できる高温逆相LC-蛍光検出により分析することで,血漿中薬物濃度分析に十分な感度で分析可能となる。
アフィニティー精製の迅速化と回収率の向上を期待して,直径約2.8 μmの磁性微粒子をアフィニティー精製用担体として使用した。抗体医薬品には抗癌剤であるBevacizumabと,関節リウマチ治療薬であるInfliximabを使用した。
作製したアフィニティビーズにより,ヒト血漿中から抗体医薬のみを選択的に補集することができ,確立した高温逆相LC条件により,血漿成分の妨害を受けることなく抗体医薬品を15分以内に分析可能であった。また,分析バリデーションを実施したところ,1-20 μg/mlの範囲において優れた定量性,精度が得られた。本法はLC-MS/MS を用いずとも十分な感度で簡便に血中薬物濃度分析が可能となることから,臨床現場での利用も期待できる。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

現在までの達成度としては,おおむね順調に進行していると考えている。その理由として,前年度に開発したトリプシン消化-LC/MS/MS分析法とは全く異なる新規分析法を構築することができたこと,さらに構築した分析法を添加血漿分析のみならず,抗体医薬が投与された関節リウマチ患者の血中薬物濃度分析まで適用できたことが挙げられる。本研究成果については,さらに臨床検体数を増やして,論文投稿を行う予定である。
次年度も問題なく研究を遂行できるものと考えている。

Strategy for Future Research Activity

H27年度は構築したイムノアフィニティー精製-高温逆相LC法をガン抗体医薬が投与された患者の血中薬物濃度分析へと適用する。本法の汎用化に向けた課題として,(1) 高価な抗体医薬イディオタイプ抗体を使用すること,(2) アフィニティー精製用磁気ビーズへの固定化の煩雑性,が挙げられる。(1)については抗体に代わる新たな分子認識素子の利用,(2)については現状のアミノ基を介した化学結合による固定化から,biotin-avidin相互作用による固定化について検討する。さらに研究代表者が開発したdress-upカラム法による可逆的な固定化についても検討することで課題の克服に努める。また,固定化担体についても現状の磁気ビーズから臨床現場でより利用しやすいモノリス型スピンカラムや固相抽出カートリッジなどの利用についても検討する。

  • Research Products

    (37 results)

All 2014 Other

All Journal Article (15 results) (of which Peer Reviewed: 15 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results,  Open Access: 2 results) Presentation (21 results) (of which Invited: 1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] 4-(4,6-Dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methylmorpholinium chloride as an enantioseparation enhancer for fluorescence chiral derivatization–liquid chromatographic analysis of DL-lactic acid.2014

    • Author(s)
      K. Todoroki, K. Goto, T. Nakano, Y. Ishii, J.-Z. Min, K. Inoue, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      J. Chromatogr. A

      Volume: 1360 Pages: 188-195

    • DOI

      10.1016/j.chroma.2014.07.077

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Simple and Sensitive Analysis of Histamine and Tyramine in Japanese Soy Sauces and Their Intermediates Using the Stable Isotope Dilution HILIC−MS/MS Method.2014

    • Author(s)
      K. Todoroki, Y. Ishii, C. Miyauchi, S. Kitagawa, J.-Z. Min, K. Inoue, T. Yamanaka, K. Suzuki, Y. Yoshikawa, N. Ohashi, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      J. Agric. Food Chem.

      Volume: 62 Pages: 6206−6211

    • DOI

      10.1021/jf500767p

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Computational Prediction of Diastereomeric Separation Behavior of Fluorescent o-Phthalaldehyde Derivatives of Amino Acids.2014

    • Author(s)
      K. Todoroki, T. Nakano, H. Watanabe, J.-Z. Min, K. Inoue, Y. Ishikawa, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      Anal. Sci.

      Volume: 30 Pages: 865-87-

    • DOI

      10.2116/analsci.30.865

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Assessment of the Efficacy of Anticancer Drugs by Amino Acid Metabolomics Using Fluorescence Derivatization-HPLC.2014

    • Author(s)
      R. Tomita, K. Todoroki, K. Machida, S. Nishida, H. Maruoka, H. Yoshida, T. Fujioka, M. Nakashima, M. Yamaguchi, H. Nohta
    • Journal Title

      Anal. Sci.

      Volume: 30 Pages: 751-758

    • DOI

      10.2116/analsci.30.751

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Determination of dicyandiamide in infant formula by stable isotope dilution hydrophilic interaction liquid chromatography with tandem mass spectrometry.2014

    • Author(s)
      K. Inoue, T. Sakamoto, J.-Z. Min, K. Todoroki, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      Food Chem.

      Volume: 156 Pages: 390-393

    • DOI

      10.1016/j.foodchem.2014.01.124

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Simultaneous microdetermination of bosentan, ambrisentan, sildenafil, and tadalafil in plasma using liquid chromatography/tandem mass spectrometry for pediatric patients with pulmonary arterial hypertension.2014

    • Author(s)
      Y. Yokoyama, M. Tomatsuri, H. Hayashi, K. Hirai, Y. Ono, Y. Yamada, K. Todoroki, T. Toyo’oka, H. Yamada, K. Itoh
    • Journal Title

      J. Pharm. Biomed. Anal.

      Volume: 89 Pages: 227–232

    • DOI

      10.1016/j.jpba.2013.11.007

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Determination of acetone in saliva by reversed-phase liquid chromatography with fluorescence detection and the monitoring of diabetes mellitus patients with ketoacidosis.2014

    • Author(s)
      S. Fujii, T. Maeda, I. Noge, Y. Kitagawa, K. Todoroki, K. Inoue, J.-Z. Min, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      Clin. Chim. Acta

      Volume: 430 Pages: 140-144

    • DOI

      10.1016/j.cca.2014.01.006

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Isotopic variants of light and heavy L-pyroglutamic acid succinimidyl esters as the derivatization reagents for dl-amino acid chiral metabolomics identification by liquid chromatography and electrospray ionization mass spectrometry.2014

    • Author(s)
      T. Mochizuki, K. Todoroki, K. Inoue, J.-Z. Min, T. Toyo’oka
    • Journal Title

      Anal. Chim. Acta

      Volume: 811 Pages: 51-59

    • DOI

      10.1016/j.aca.2013.12.016

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Evaluation of a series of prolylamidepyridines as the chiral derivatization reagents for enantioseparation of carboxylic acids by LC–ESI–MS/MS and the application to human saliva.2014

    • Author(s)
      T. Kuwabara, T. Takayama, K. Todoroki, K. Inoue, J.-Z. Min, T. Toyo’oka
    • Journal Title

      Anal. Bioanal. Chem.

      Volume: 406 Pages: 2641-2649

    • DOI

      10.1007/s00216-014-7637-7

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A quantitative analysis of the polyamine in lung cancer patient fingernails by LC-ESI-MS/MS.2014

    • Author(s)
      J.-Z. Min, A. Matsumoto, G. Li, Y.-Z. Jiang, H.-F. Yu, K. Todoroki, K. Inoue, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      Biomed. Chromatogr.

      Volume: 28 Pages: 492–499

    • DOI

      10.1002/bmc.3059

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] UPLC/ESI-MS/MS-based determination of metabolism of several new illicit drugs, ADB-FUBINACA, AB-FUBINACA, AB-PINACA, QUPIC, 5F-QUPIC and α-PVT, by human liver microsome.2014

    • Author(s)
      T. Takayama, M. Suzuki, K. Todoroki, K. Inoue, J.-Z. Min, R. Kikura-Hanajiri, Y. Goda, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      Biomed. Chromatogr.

      Volume: 28 Pages: 831-838

    • DOI

      10.1002/bmc.3155

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] In vivo imaging of reactive oxygen species in mouse brain by using [3H]Hydromethidine as a potential radical trapping radiotracer.2014

    • Author(s)
      K. Abe, N. Takai, K. Fukumoto, N. Imamoto, M. Tonomura, M. Ito, N. Kanegawa, K. Sakai, K. Morimoto, K. Todoroki, O. Inoue
    • Journal Title

      J. Cereb. Blood Flow Metab.

      Volume: 34 Pages: 1907-1913

    • DOI

      10.1038/jcbfm.2014.160

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Liquid chromatography/tandem mass spectrometry with fluorous derivatization method for selective analysis of sialyl oligosaccharides.2014

    • Author(s)
      Y. Sakaguchi, T. Hayama, H. Yoshida, M. Itoyama, K. Todoroki, M. Yamaguchi, H. Nohta
    • Journal Title

      Rapid Commun. Mass Spectrom.

      Volume: 28 Pages: 2481–2489

    • DOI

      10.1002/rcm.7042

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Rapid and sensitive determination of diacetylpolyamines in human fingernail by ultraperformance liquid chromatography coupled with electrospray ionization tandem mass spectrometry.2014

    • Author(s)
      J.-Z. Min, Y. Morota, Y.-Z. Jiang, G. Li, D. Kang, H.-F. Yu, K. Inoue, K. Todoroki, T. Toyo'oka
    • Journal Title

      Eur. J. Mass Spectrom.

      Volume: 20 Pages: 477-486

    • DOI

      10.1255/ejms.1301

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Evaluation of gardenia yellow using crocetin from alkaline hydrolysis based on ultra high performance liquid chromatography and high-speed countercurrent.2014

    • Author(s)
      K. Inoue, C. Tanada, H. Nishikawa, S. Matsuda, A. Tada, Y. Ito, J.-Z. Min, K. Todoroki, N. Sugimoto, T. Toyo'oka, H. Akiyama
    • Journal Title

      J. Sep. Sci.

      Volume: 37 Pages: 3619-3624

    • DOI

      10.1002/jssc.201400793

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 再現性の高い固定相の着脱を可能とするドレスアップキラルカラムの開発2014

    • Author(s)
      石井裕大、轟木堅一郎、井出貴文、閔 俊哲、井之上浩一、濱島義隆、豊岡利正
    • Organizer
      第25回クロマトグラフィー科学会議(京都)
    • Place of Presentation
      京都大学船井哲良記念講堂
    • Year and Date
      2014-12-12 – 2014-12-12
  • [Presentation] イムノアフィニティー磁気ビーズと高温逆相LCを組み合わせた抗体医薬の血中薬物濃度分析2014

    • Author(s)
      中野達基、江田康拓、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      第25回クロマトグラフィー科学会議(京都)
    • Place of Presentation
      京都大学船井哲良記念講堂
    • Year and Date
      2014-12-12 – 2014-12-12
  • [Presentation] イムノアフィニティー精製-高温逆相LCによる抗体医薬品の血中薬物濃度分析法の開発2014

    • Author(s)
      江田康拓、中野達基、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      新アミノ酸分析研究会第4回学術講演会(東京)
    • Place of Presentation
      東京大学武田先端知ビル
    • Year and Date
      2014-11-17 – 2014-11-17
  • [Presentation] トリアジン構造を光学分離向上剤として用いるアミノ酸のHPLC分離分析法の開発2014

    • Author(s)
      中村美鈴、佐藤雄飛、後藤かの子、中野達基、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      新アミノ酸分析研究会第4回学術講演会(東京)
    • Place of Presentation
      東京大学武田先端知ビル
    • Year and Date
      2014-11-17 – 2014-11-17
  • [Presentation] 遠隔位不斉識別試薬を用いるアミノ酸およびペプチド類のHPLC光学分離2014

    • Author(s)
      佐藤雄飛、中野達基、轟木堅一郎、井口和明、閔 俊哲、井之上浩一、武田厚司、豊岡利正:
    • Organizer
      新アミノ酸分析研究会第4回学術講演会(東京)
    • Place of Presentation
      東京大学武田先端知ビル
    • Year and Date
      2014-11-17 – 2014-11-17
  • [Presentation] イムノアフィニティー精製-高温逆相LCによる抗体医薬品の血漿中薬物濃度分析法の開発2014

    • Author(s)
      江田康拓、中野達基、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      日本病院薬剤師会東海ブロック・日本薬学会東海支部合同学術大会2014
    • Place of Presentation
      静岡県立大学
    • Year and Date
      2014-11-09 – 2014-11-09
  • [Presentation] 遠隔位不斉識別試薬を用いるアミノ酸およびペプチド類のHPLC光学分離分析2014

    • Author(s)
      佐藤雄飛、中野達基、轟木堅一郎、井口和明、閔 俊哲、井之上浩一、武田厚司、豊岡利正
    • Organizer
      日本病院薬剤師会東海ブロック・日本薬学会東海支部合同学術大会2014
    • Place of Presentation
      静岡県立大学
    • Year and Date
      2014-11-09 – 2014-11-09
  • [Presentation] Simple and sensitive analysis of histamine and tyramine in Japanese soy sauces and their intermediates using the stable isotope dilution HILIC–MS/MS method.2014

    • Author(s)
      Yasuhiro Ishii, Kenichiro Todoroki, Chiemi Miyauchi, Sachiyo Kitagawa, Jun Zhe Min, Koichi Inoue, Kuniaki Suzuki, Yuko Yoshikawa, Norio Ohashi, Toshimasa Toyo’oka
    • Organizer
      第19回静岡健康・長寿学術フォーラム(沼津)
    • Place of Presentation
      ふじのくに千本松フォーラム
    • Year and Date
      2014-11-07 – 2014-11-07
  • [Presentation] 4-(4,6-Dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methylmorpholinium chloride as an enantioseparation enhancer for fluorescence chiral derivatization - Liquid Chromatographic analysis of DL-lactic acid.2014

    • Author(s)
      Kanoko Goto, Tatsuki Nakano, Yasuhiro Ishii, Kenichiro Todoroki, Jun Zhe Min, Koichi Inoue, Toshimasa Toyo’oka
    • Organizer
      第19回静岡健康・長寿学術フォーラム(沼津)
    • Place of Presentation
      ふじのくに千本松フォーラム
    • Year and Date
      2014-11-07 – 2014-11-07
  • [Presentation] 4-(4,6-Dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methylmorpholinium chloride as an enantioseparation enhancer for fluorescence chiral derivatization - Liquid Chromatographic analysis of DL-lactic acid.2014

    • Author(s)
      Kenichiro Todoroki, Kanoko Goto, Tatsuki Nakano, Yasuhiro Ishii, Jun Zhe Min, Koichi Inoue, Toshimasa Toyo’oka
    • Organizer
      11th Japan-China International Symposium on Health Sciences (Shizuoka)
    • Place of Presentation
      静岡県立大学
    • Year and Date
      2014-11-06 – 2014-11-06
  • [Presentation] フルオラス分離技術を基盤とする新規分離デバイスDress-upキラルカラムの開発とカルボン酸分離への応用2014

    • Author(s)
      石井裕大、轟木堅一郎、井出貴文、閔 俊哲、井之上浩一、濱島義隆、豊岡利正
    • Organizer
      フルオラス科学研究会第7回シンポジウム(札幌)
    • Place of Presentation
      北海道大学
    • Year and Date
      2014-09-09 – 2014-09-09
  • [Presentation] 選択的な捕集と検出を可能とするフルオラスプロテオミクス解析試薬の開発2014

    • Author(s)
      石井裕大、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      フルオラス科学研究会第7回シンポジウム(札幌)
    • Place of Presentation
      北海道大学
    • Year and Date
      2014-09-09 – 2014-09-09
  • [Presentation] Dress-up chiral column: a new separation device for chiral compounds.2014

    • Author(s)
      Yasuhiro Ishii, Kenichiro Todoroki, Takafumi Ide, Jun Zhe Min, Koichi Inoue, Yoshitaka Hamashima, Toshimasa Toyo’oka
    • Organizer
      RSC International Conference 2014
    • Place of Presentation
      幕張メッセ国際会議場
    • Year and Date
      2014-09-05 – 2014-09-05
  • [Presentation] 4-(4,6-Dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methylmorpholinium chloride as an enantioseparation enhancer for fluorescence chiral derivatization - liquid chromatographic analysis of DL-lactic acid.2014

    • Author(s)
      Kanoko Goto, Tatsuki Nakano, Yasuhiro Ishii, Kenichiro Todoroki, Jun Zhe Min, Koichi Inoue, Toshimasa Toyo’oka
    • Organizer
      RSC International Conference 2014
    • Place of Presentation
      幕張メッセ国際会議場
    • Year and Date
      2014-09-04 – 2014-09-04
  • [Presentation] キラル化合物の新規分離デバイス Dress-upキラルカラムのカルボン酸分離への応用2014

    • Author(s)
      石井裕大、轟木堅一郎、井出貴文、閔 俊哲、井之上浩一、濱島義隆、豊岡利正
    • Organizer
      第12回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム2014(箱根)
    • Place of Presentation
      箱根高原ホテル
    • Year and Date
      2014-07-15 – 2014-07-15
  • [Presentation] イムノアフィニティー精製-高温逆相LCによる抗体医薬品の血漿中薬物濃度分析法の開発2014

    • Author(s)
      中野達基、江田康拓、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      第12回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム2014(箱根)
    • Place of Presentation
      箱根高原ホテル
    • Year and Date
      2014-07-14 – 2014-07-14
  • [Presentation] LCMS-8040を用いた医薬品および食品関連物質の簡便かつ高感度な分析法の開発2014

    • Author(s)
      轟木堅一郎
    • Organizer
      島津食品分析セミナーin静岡(静岡)
    • Place of Presentation
      静岡駅パルシェ会議室
    • Year and Date
      2014-07-08 – 2014-07-08
    • Invited
  • [Presentation] DMT-MMを光学分離向上剤として用いるアミノ酸のHPLC分離分析法の開発2014

    • Author(s)
      中村美鈴、佐藤雄飛、後藤かの子、中野達基、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      第60回日本薬学会東海支部大会(鈴鹿)
    • Place of Presentation
      鈴鹿医療科学大学薬学部
    • Year and Date
      2014-07-05 – 2014-07-05
  • [Presentation] 遠隔位不斉識別試薬を用いるアミノ酸およびペプチド類のHPLC光学分離分析法の開発2014

    • Author(s)
      佐藤雄飛、中村美鈴、中野達基、後藤かの子、轟木堅一郎、閔 俊哲、井之上浩一、豊岡利正
    • Organizer
      第60回日本薬学会東海支部大会(鈴鹿)
    • Place of Presentation
      鈴鹿医療科学大学薬学部
    • Year and Date
      2014-07-05 – 2014-07-05
  • [Presentation] カルボン酸光学分離用Cinchona alkaloid型dress-upキラルカラムの開発2014

    • Author(s)
      石井裕大、轟木堅一郎、井出貴文、閔 俊哲、井之上浩一、濱島義隆、豊岡利正
    • Organizer
      第21回クロマトグラフィーシンポジウム(名古屋)
    • Place of Presentation
      名古屋市工業研究所
    • Year and Date
      2014-06-06 – 2014-06-06
  • [Presentation] 量子化学計算に基づくアミノ酸ジアステレオマーの光学分離メカニズムの考察2014

    • Author(s)
      中野 達基、轟木 堅一郎、石川 吉伸、閔 俊哲、井之上 浩一、豊岡 利正
    • Organizer
      第74回分析化学討論会(郡山)
    • Place of Presentation
      日本大学郡山キャンパス
    • Year and Date
      2014-05-24 – 2014-05-24
  • [Remarks] 所属研究室(静岡県立大学薬学部生体機能分子分析学分野)のHP

    • URL

      http://w3pharm.u-shizuoka-ken.ac.jp/~analchem/

URL: 

Published: 2016-05-27  

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