2013 Fiscal Year Research-status Report
多能性幹細胞のAW551984による心筋分化制御機構の解明
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25460083
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | National Institute of Health Sciences |
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Principal Investigator |
安田 智 国立医薬品食品衛生研究所, 遺伝子細胞医薬部, 室長 (20381262)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 発生・分化 / 多能性幹細胞 / 心筋細胞 |
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| Research Abstract |
ES細胞やiPS細胞といった多能性幹細胞から心筋細胞を作製し、心機能不全の治療に用いる試みが現在盛んに行われている。このような多能性幹細胞を利用した製品の再生医療への応用のためには、多能性幹細胞から心筋細胞への分化効率や精製度を極力高くすることが必要と考えられており、世界中で精力的に研究が行われている。近年の研究により、Wnt/β-cateninシグナルやBMPシグナルが心筋細胞分化に重要な役割を果たすことが明らかになったが、心筋細胞分化の詳細な分子メカニズムには不明な点が多い。我々は、マウス胚性がん細胞（EC細胞）とES細胞の心筋細胞分化の制御因子としてAW551984を既に見出している。AW551984は、VITドメインとVWAドメインを有する分子的な機能が未知のタンパク質であり、このタンパク質の細胞内局在についてもまだ明らかになっていない。プルダウンアッセイとLC-MS/MS解析により同定したAW551984 VITドメイン結合タンパク質の発現を、これらをエンコードする遺伝子を標的とするsiRNAによりマウスES細胞において抑制し、心筋細胞への分化に及ぼす影響を検討した。ES細胞の心筋細胞への分化は、拍動する胚葉体数と心筋特異的遺伝子発現によって評価した。AW551984結合タンパク質の中で心筋分化の制御に関わるものが見出されたため、現在これらの心筋細胞分化における役割の解明を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の研究計画の通りに研究は進んでいる。AW551984に結合するタンパク質の中からマウスES細胞の心筋細胞分化に関与するものが、ノックダウン実験により明らかになったため、研究計画の大幅な変更なしに今後の研究をスムーズに進められることが予想される。
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| Strategy for Future Research Activity |
AW551984の結合タンパク質の分子生物学・生化学的な解析を中心に行い、心筋細胞分化におけるAW551984の分子的役割を明らかにしていきたい。既に多能性幹細胞の心筋細胞分化において重要な細胞シグナルが報告されているため、まずAW551984結合タンパク質がこれらの細胞シグナルを調節する可能性について検討したい。またAW551984のヒトホモログであるVWA5Aが、ヒト多能性幹細胞の心筋細胞分化においても機能的な役割を持つのかも明らかにしたい。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
H25年度に使用する予定の試薬が輸入待ちとなり、納入時期が遅れたため。
予定の試薬が納入され次第、これらの試薬を使用した実験をH26年度に合わせて行う予定である。
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