2015 Fiscal Year Annual Research Report
カルシウム活性化クロライドチャネルTMEM16の新規修飾サブユニットの同定
| Project/Area Number |
25460104
|
|---|
| Research Institution | Nagoya City University |
|---|
Principal Investigator |
山村 寿男 名古屋市立大学, 薬学研究科(研究院), 准教授 (80398362)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
|
| Keywords | クロライドチャネル / カルシウム / TMEM16A / 血管 / 平滑筋 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
カルシウム活性化クロライドチャネルは、細胞内カルシウム濃度の上昇により活性化され、血管平滑筋細胞を脱分極すなわち収縮方向へ誘導する。我々は、カルシウム活性化クロライドチャネルの分子実体として同定されたTMEM16Aチャネルに注目し、血管平滑筋におけるTMEM16Aチャネルの機能解析およびその活性を修飾する因子の同定を行ってきた。本年度は、血管平滑筋に豊富に発現しているTMEM16Aチャネルに対する他のTMEM16ファミリー遺伝子の影響を解析した。ヒトおよびラットTMEM16A（細胞内カルシウムに対する感受性は高い、活性化および不活性化は遅い）を発現させたHEK293細胞にTMEM16B（細胞内カルシウムに対する感受性は低い、活性化および不活性化は早い、カルシウム活性化クロライドチャネル活性を有する）を一過性に遺伝子導入し、パッチクランプ法を用いて電気生理学的および薬理学的解析を行った。その結果、共発現により、TMEM16Aチャネルの細胞内カルシウム感受性が低下し、活性化および不活性化が早くなった。その変化量は、TMEM16Bの導入量に比例した。次に、TMEM16AとTMEM16Bの相互作用を検出するため、全反射蛍光（TIRF）顕微鏡下での蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）解析および共焦点蛍光顕微鏡下での蛍光タンパク質再構成法（BiFC）アッセイを行った。その結果、TMEM16AはTMEM16Bと相互作用し、ヘテロ二量体として機能的カルシウム活性化クロライドチャネルを形成できることが示唆された。本研究成果は、TMEM16チャネルの生理機能を解明する上で、非常に重要な知見であると考えられる。
|
-
-
-
-
[Journal Article] Pathogenic role of calcium-sensing receptors in the development and progression of pulmonary hypertension.2016
Author(s)
Tang H, Yamamura A, Yamamura H, Song S, Fraidenburg DR, Chen J, Gu Y, Pohl NM, Zhou T, Jiménez-Pérez L, Ayon RJ, Desai AA, Goltzman D, Rischard F, Khalpey Z, Black SM, Garcia JG, Makino A, Yuan JX.
-
Journal Title
Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Notch activation of Ca2+ signaling in the development of hypoxic pulmonary vasoconstriction and pulmonary hypertension.2015
Author(s)
Smith KA, Voiriot G, Tang H, Fraidenburg DR, Song S, Yamamura H, Yamamura A, Guo Q, Wan J, Pohl NM, Tauseef M, Bodmer R, Ocorr K, Thistlethwaite PA, Haddad GG, Powell FL, Makino A, Mehta D, Yuan JX.
-
Journal Title
Am J Respir Cell Mol Biol
Volume: 53(3)
Pages: 355-67
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
