2015 Fiscal Year Annual Research Report
消化管吸収性の改善を指向した天然機能性化合物の配糖体化
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25460127
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| Research Institution | The Makino Memorial Foundation of Kochi Prefecture |
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Principal Investigator |
水上 元 公益財団法人高知県牧野記念財団, その他部局等, その他 (30128219)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
寺坂 和祥 名古屋市立大学, 薬学研究科(研究院), 講師 (60405214)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 糖転移酵素 / 植物機能性化合物 / 酵素的配糖体合成 / 消化管グルコシダーゼ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
配糖体合成に用いる糖転移酵素ライブラリーを拡大するためのcDNAクローニングを継続して実施した。イチゴの香気成分4-hydroxy-2,5-dimethyl-3(2H)-furanone（HDMF）の配糖化酵素のクローニングに関してEST情報を活用することにより、平成26年度までの研究においてFaGT1～FaGT9までの候補クローンを花托から単離していた。今年度は新たにFaGT10～FaGT13の4クローンを単離した。これらをHis-tagタンパク質として発現させて得た組換酵素のHDMFに対する配糖化活性を調べたところ、FaGT9に加えて、FaGT13に糖転移活性を見出し、HDMFに対する基質特異性も高いことが明らかになった。現在、組換酵素を用いてHDMF配糖体の大量調製を実施している。
ラットおよびヒトの小腸由来のcDNAライブラリーからlactose-phlorizin hydrase遺伝子のcDNAを単離し、発現用ベクターpCI-neoに組み込んでHEK239細胞に導入した。形質転換した細胞から調製した粗酵素液にbeta-glucosidase活性があることを確認できたが、発現レベルが安定せず、現在形質転換法について検討中である。
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Research Products
(2 results)
