2014 Fiscal Year Research-status Report
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25460170
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
瀧井 猛将 名古屋市立大学, 薬学研究科(研究院), 准教授 (80244573)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 結核菌 / 感染症 / 病原性 / サイトカイン / 細胞傷害活性 / 核酸 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
結核菌はヒト線維芽細胞株，及びヒトマクロファージに対して生菌特異的に細胞傷害活性を持つことを明らかにした (Takii, et al., J Interferon Cytokine Res. 2001)．感染した宿主細胞の培養上清を濾過滅菌した試料には細胞傷害活性が認められる．さらに，この培養上清は結核菌に対しても抗菌活性を示す．現在，培養上清に含まれる細胞傷害活性因子，及び，抗菌活性物質を同定するために感染後，培養上清を回収し，各種カラムにより分離精製を進めている．
近年，ワクチンアジュバントに用いられているアラムアジュバント（アルミニウム塩）の作用機序について宿主の好中球のDNAが網目状に組織に流失していること関与していることが報告された(Marichai, et al., Nat Med. 2011)．このDNAはマクロファージなどの抗原提示細胞の表面上に発現している自然免疫受容体(toll like receptors; TLRs)のリガンドとして働いていることが示されている．
この知見と結核菌生菌の宿主細胞傷害活性の獲得免疫に対する効果を考えると，宿主や菌由来のDNAが細胞外や菌体外に放出された結果，これらの核酸が免疫応答を活性化する可能性が想定される．本年度は細菌のDNAであるCpGオリゴで誘導されるサイトカインの産生誘導活性について検討したところ，マクロファージや線維芽細胞株には毒性は認められなかったことからCpGは結核菌生菌の直接的な宿主細胞傷害活性には関係していないことが示された．一方，サイトカイン誘導能は有していることから，宿主内で殺菌された菌から放出されたCpGが生菌特異的な細胞傷害活性をサイトカイン誘導を介して関節的に増強させている可能性が示唆された．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
核酸成分について，細胞傷害活性に果たす役割について検証することが出来た．現在進めている細胞傷害活性因子の精製と解析では複数の候補化合物が存在することが明らかになってきた．そのうちの１つであるペプチド同画分に細胞傷害活性と抗菌活性の両方を持ち，細胞傷害活性の因子の１つである可能性が示唆された．
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| Strategy for Future Research Activity |
ペプチド成分の細胞傷害活性に対する機構解析を進める．該因子に対する抗体等の検出系を確立し，結核感染や治療時での結核菌の活動状況をモニター（バイオマーカーとしての応用を目指す）できるかを検討する．また，抗原としてワクチンの開発への応用を試みる．
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| Causes of Carryover |
その他に計上していた予算が計画書どうりに執行出来なかった．
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
物品の購入、旅費に使用する予定である．
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