メチル化ＤＮＡ結合タンパク質ＣＩＢＺが心筋分化を制御するメカニズムの解析

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25460368
• Research Institution: Nara Institute of Science and Technology
• Principal Investigator: 松田 永照 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 助教 (00335481)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: ES細胞 / 心筋細胞 / 細胞分化 / ノックアウトマウス / Creマウス / 転写因子 / 転写制御 / 胚様体

Outline of Annual Research Achievements

CIBZ 遺伝子を欠損したマウス胚性幹 （CIBZ -/- ES） 細胞を分化誘導させた場合、この細胞の心筋細胞への分化促進現象（心筋の拍動を開始する時期の早期化と拍動範囲の拡大）が確認された。興味深いことに、野生型ES細胞と比較した場合、CIBZ -/- ES細胞では中胚葉及び心血管系譜細胞特異的なマーカーであるTとMesp1の発現が比較的に早い時期に上昇することが分かった。
ES細胞にCIBZ遺伝子が安定的に発現する細胞株を作製した。細胞の分化誘導実験において、CIBZの過剰発現はES細胞の心筋細胞への分化を抑制する現象が確かめられた。レポーターアッセイを用いた実験で、CIBZはTとMesp1のプロモーターを抑制することが分かった。
Cre-loxPシステムを用いた条件付き破壊ベクターをES細胞に導入し、CIBZ flox/+マウスを作製した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

１，CIBZがES細胞の心筋への分化を制御するメカニズムは、CIBZがTとMesp1への転写を抑制することによって行うことが考えられる。
２，CIBZ flox/+マウスの作製に成功した。

Strategy for Future Research Activity

１，CIBZがES細胞の心筋への分化を制御するメカニズムをさらに調べる。
２，片側アレルCIBZ欠損のマウスを作製する。

Causes of Carryover

１、CIBZ条件的に破壊するマウスの作製について、作製費用が次年度に請求されることがある。
２、CIBZがES細胞の心筋分化を制御するメカニズムについて、まだ発注していない細胞用の試薬と抗体などが残っている。

Expenditure Plan for Carryover Budget

細胞用の試薬と抗体などを発注する。