• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2013 Fiscal Year Research-status Report

細胞の分化及び生存に影響を及ぼす新たなRNA代謝機構

Research Project

Project/Area Number 25460371
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Research InstitutionKochi University

Principal Investigator

坂本 修士  高知大学, 教育研究部医療学系, 准教授 (80397546)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords筋成熟 / ミオパチー / 中心核 / miRNA / NF90 / NF45 / Dynamin2 / 骨格筋
Research Abstract

これまでの解析でNF90-NF45 double transgenic (dbTg)マウスの骨格筋では核が中心に局在し(中心核)、未成熟な筋繊維が多く存在することが分かっている。この中心核は筋疾患(ミオパチー)においてしばしば観察されるため、本研究課題でNF90-NF45 dbTgマウスにおける中心核の発生機序を明らかにすることは、ミオパチーの発症機序の解明や当該疾患の治療法の開発において有益な情報になるものと考えている。そこでまず我々は、NF90-NF45がマイクロRNA(miRNA)生合成を負に制御することに着目し、野生型とdbTgマウスの骨格筋におけるmiRNAの網羅的な発現解析を行った。その結果、dbTgマウスで筋成熟に関与するmiR-133aの発現低下を見出すことができた。我々はこれまでにNF90-NF45はpri-miRNAに結合し、そのプロセッシングを抑制することでmiRNAの生合成を負に調節することを見出している。そこでmiR-133aの初期転写産物(primary: pri-miR-133a )に対するNF90-NF45の結合能とNF90-NF45がpri-miR-133aのプロセッシングに及ぼす影響を検討した。その結果、NF90-NF45はpri-miR-133aに直接結合し、そのプロセッシングを抑制することを見出した。miR-133aの標的の1つであるDynamin2 (Dnm2)は、その発現上昇が中心核発生の要因になることが知られている。そこで野生型とdbTgマウスの骨格筋におけるDnm2の発現を解析した。その結果dbTgマウスの骨格筋でDnm2の発現が増加していた。これらの解析結果より、dbTgマウスの骨格筋における中心核の発生は、NF90-NF45によるmiR-133aの産生抑制を介したDnm2の発現促進によるものと考えられた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の計画通り、NF90-NF45 dbTgマウスの骨格筋において筋繊維の中心核化及び未成熟化に影響を及ぼす可能性があるmiRNAとその標的因子を同定することができた。

Strategy for Future Research Activity

1. 平成25年度の計画遂行で、個体レベルにおいて筋繊維の中心核化・未成熟化を引き起こすmiRNA及びその標的因子の発現制御にNF90-NF45が関与することを示すことができた。今後は、個体レベルで明らかになったNF90-NF45による筋成熟関連miRNA及びその標的因子の産生制御を確証するために、主に下記の点をNF90-NF45の発現を変動させた骨格筋由来の培養細胞を用いて検証する。
・個体レベルで同定したmiRNAとその初期転写産物であるpri-miRNAの発現解析
・個体レベルで同定したmiRNAの標的因子の発現解析
・In vitroにおける筋成熟化への影響
これらの解析を行うことにより、NF90-NF45が骨格筋の中心核化・未成熟化を引き起こすメカニズムを明らかにする。
2. 申請者らはこれまでにNF90 Tgマウスを作成し表現型の解析を行ってきた。その結果、Tgマウスは筋組織においてミトコンドリアが変性しており、それに伴い筋量・筋力及び心機能の低下が確認された。またこのミトコンドリア変性は、核内ミトコンドリア遺伝子発現のマスター制御因子PGC-1, NRF-1の産生が翻訳レベルで抑制され、オートファジーが誘導された結果であることが分かった。しかしながら、NF90の過剰発現により何故PGC-1やNRF-1の翻訳が抑制されるのかは不明のままである。本課題ではこの点を解明することも目指している。

  • Research Products

    (8 results)

All 2013

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (7 results)

  • [Journal Article] Bofutsushosan, a Japanese herbal (Kampo) medicine, attenuates progression of nonalcoholic steatohepatitis in mice.2013

    • Author(s)
      Ono M, Ogasawara M, Hirose A, Mogami S, Ootake N, Aritake K, Higuchi T, Okamoto N, Sakamoto S, Yamamoto M, Urade Y, Saibara T, Oben JA.
    • Journal Title

      Journal of Gastroenterology

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1007/s00535-013-0852-8

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Identification of a motif in NF90 protein that is involved in inhibition of microRNA biogenesis.2013

    • Author(s)
      Yamaguchi F, Todaka H, Higuchi T, Morisawa K, Sugiyama Y, Sakamoto S.
    • Organizer
      第36回 日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド (神戸)
    • Year and Date
      20131203-20131206
  • [Presentation] NF90-NF45 complex impairs muscular maturation via blockade of miR-133 biogenesis.2013

    • Author(s)
      Todaka H, Higuchi T, Yagyu K, Yamaguchi F, Morisawa K, Fukushima A, Tsuda M, Sugiyama Y, Sakamoto S.
    • Organizer
      第36回 日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド (神戸)
    • Year and Date
      20131203-20131206
  • [Presentation] NF90-NF45 regulates an expression of EGFR through suppression of miR-7 biogenesis in hepatocellular carcinoma.2013

    • Author(s)
      Higuchi T, Todaka H, Morisawa K, Yamaguchi F, Ono M, Sugiyama Y, Tsuda M, Sakamoto S.
    • Organizer
      第36回 日本分子生物学会年会
    • Place of Presentation
      神戸ポートアイランド (神戸)
    • Year and Date
      20131203-20131206
  • [Presentation] Overexpression of NF90-NF45 complex causes centronuclear muscle fibers through blockade of microRNA biogenesis.2013

    • Author(s)
      Todaka H, Higuchi T, Yagyu K, Yamaguchi F, Morisawa K, Fukushima A, Tsuda M, Sugiyama Y, Sakamoto S.
    • Organizer
      第15回RNA学会年会
    • Place of Presentation
      愛媛県県民文化会館ひめぎんホール (愛媛)
    • Year and Date
      20130724-20130728
  • [Presentation] Suppression of miR-7 biogenesis by NF90-NF45 complex in Hepatocellular Carcinoma.2013

    • Author(s)
      Higuchi T, Todaka H, Yamaguchi F, Morisawa K, Ono M, Sugiyama Y, Tsuda M, Sakamoto S.
    • Organizer
      第15回RNA学会年会
    • Place of Presentation
      愛媛県県民文化会館ひめぎんホール (愛媛)
    • Year and Date
      20130724-20130726
  • [Presentation] NF90及びNF45によるmiRNA-7生合成阻害を介した腫瘍化制御機構の解明2013

    • Author(s)
      樋口琢磨, 戸高寛, 池恩秀, 山口史佳, 森澤啓子, 小野正文, 杉山康憲, 津田雅之, 坂本修士, 谷口武利.
    • Organizer
      第54回日本生化学会 中国・四国支部例会
    • Place of Presentation
      徳島大学 大塚講堂 (徳島)
    • Year and Date
      20130531-20130601
  • [Presentation] NF90-NF45複合体によるmiRNA産生調節を介した筋成熟抑制2013

    • Author(s)
      戸高寛, 樋口琢磨, 矢生健一, 森澤啓子, 山口史佳, 池恩秀, 福島敦樹, 津田雅之, 杉山康憲, 坂本修士.
    • Organizer
      第54回日本生化学会 中国・四国支部例会
    • Place of Presentation
      徳島大学 大塚講堂 (徳島)
    • Year and Date
      20130531-20130601

URL: 

Published: 2015-05-28  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi