2013 Fiscal Year Research-status Report
肺腺癌におけるCADM1過剰発現による悪性形質獲得機構の解明
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25460432
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
松原 大祐 東京大学, 医科学研究所, 講師 (80415554)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | CADM1 / lung adenocarcinoma / RAPGEF2 / EMT / PRMT5 |
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| Research Abstract |
肺腺癌40株のDNAマイクロアレイのデータをもとに、CADM1遺伝子発現を比較したところ、40株中31株でCADM1の発現はほぼなかったが、意外なことに、CADM1の過剰発現は、「気管支上皮型」(9%(2/22))よりも、EMT形質を有する「非気管支上皮型」(39%(7/18))で高頻度にみられた。CADM1は肺腺癌において腫瘍抑制遺伝子と考えられてきたが、「非気管支上皮型」の中のある一群は、ATLと同様に、CADM1をうまく利用して腫瘍促進に働くのではないか、との考察に至った。肺腺癌細胞株40株のDNAマイクロアレイのデータをもとに、CADM1発現と相関性の高い遺伝子を検討した結果、RAS-associated protein (RAP)のグアニン・ヌクレオチド交換因子（GEF）であるRAPGEF2が抽出された。RAPGEF2は、ATLにおけるTiam-1と同じくType II PDZドメインを有する事から、CADM1と結合することで腫瘍促進に働く可能性が示唆された。我々は、western blotting法で、12株の肺腺癌細胞株において、タンパクレベルにおいて。CADM1とRAPGEF2の発現が相関することを確認した。また、H522やH1838等の細胞株を用いて、IP assayにより、RAPGEF2とCADM1が複合体を形成していることを確認し、さらに、Immunocytochemistryによって、RAPGEF2とCADM1の共局在を確認した。肺腺癌症例160例を用いた検討では、RAPGEF2とCADM1の免疫染色を施行したところ、RAPGEF2とCADM1の発現は、細胞株と異なり、逆相関することがわかった。ただし、CADM1陰性例においては、RAPGEF2陽性例(13例)、陰性例(35例)で予後に差はみられなかったが、一方、CADM1陽性症例において、RAPGEF2陰性例(78例)は予後良好であるのに対し、RAPGEF2陽性例(8例)はCADM1陰性例よりも予後不良であり、RAPGEF2とCADM1の共発現によって、悪性形質を獲得する可能性が示唆された。また、我々は肺腺癌のEMTに関わるヒストンメチル化酵素としてPRMT5を同定し、細胞株、肺腺癌組織検体を用いて検討した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
IP assay, ICCによる、RAPGEF2とCADM1の複合体形成、共局在を確認した。また、肺腺癌症例を用いた解析では、やはり、RAPGEF2とCADM1の強発現によって、予後不良となることを確認できた。また、同時進行で、肺腺癌のEMTに関わるヒストンメチル化酵素PRMT5を見出し、細胞株、原発性肺腺癌症例を用いた、免疫細胞化学的、免疫組織化学的検討を行ない、その結果を、Human Pathology誌に投稿し、受理された。
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| Strategy for Future Research Activity |
RAPGEF2とCADM1にInteractionにより、RAP活性にどのような影響を与えるか、また、腫瘍の増殖能、浸潤能、薬剤抵抗性などに、どのような影響を与えるのかを、in vitro, in vivoにて検討していく。
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[Journal Article] Expression of PRMT5 in lung adenocarcinoma and its significance in epithelial-mesenchymal transition2014
Author(s)
Reem Ibrahim, Daisuke Matsubara (Corresponding author), Wael Osman, Teppei Morikawa, Akiteru Goto, Shigeki Morita, Shumpei Ishikawa, Hiroyuki Aburatani, Daiya Takai, Jun Nakajima, Masashi Fukayama, Toshiro Niki, Yoshinori Murakami,
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Journal Title
Human Pathology
Volume: in press
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed
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