神経因性疼痛における新規KチャネルとATPの役割に関する研究

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25460731
• Research Institution: Hyogo University of Health Sciences
• Principal Investigator: 山本 悟史 兵庫医療大学, 薬学部, 教授 (60220464)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田中 康一 兵庫医療大学, 薬学部, 助教 (30274848)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 神経因性疼痛 / 脊髄後根神経節 / K+チャネル / 熱 / ATP / ATP受容体

Outline of Annual Research Achievements

目的：「末梢神経傷害が交感神経節後細胞の発芽を誘起し，その軸索が脊髄後根神経節神経細胞（DRG神経細胞）に到達している」という報告がある．我々は，交感神経から放出されるノルアドレナリン（NA）が新規Kチャネル（Kheatチャネル）を抑制することを報告しており，またNAはDRG神経細胞からATPを放出させることが示されている．本研究では，「ATPがP2Y受容体を介してKheatチャネルやTRPV1受容体に作用し，神経因性疼痛の発生要因になっている」と仮説を立て，その可能性について検討する．本年度は，単一のDRG神経細胞における「TRPV1受容体に対するATPの作用」について，パッチクランプ法を用いて電気生理学的に検証する．
方法： パッチクランプ法を使用してDRG神経細胞から膜電流記録を行い， １．熱刺激によって誘起されたKheatチャネル電流（IKheat）を測定できる細胞を確認する．さらに，測定条件を変えて，同一細胞において，TRPV1受容体の活性化による電流（ITRPV1）を測定し，これがATPによって制御されるか否かについて検討する．２．ATPによってITRPV1が制御された場合，その機序が温度依存性の変化によるものか，を検討する．
結果：１．熱刺激によりDRG神経細胞においてIKheatが誘起された．引き続き同一細胞においてITRPV1の測定を試みたが，ITRPV1を記録できる細胞は非常に少なく，またITRPV1は大きさが小さかったため，ATPによるITRPV1の制御までは確認できなかった．２．上記１．に記載したようにITRPV1を記録することが困難であったため，ATPによるITRPV1の温度依存性制御は検証できなかった．