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2014 Fiscal Year Research-status Report

ヒト培養バレット上皮のエピゲノム解析と幹細胞性の実証を基盤とした新規予防治療法

Research Project

Project/Area Number 25460923
Research InstitutionAsahikawa Medical College

Principal Investigator

盛一 健太郎  旭川医科大学, 医学部, 講師 (70455715)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 水上 裕輔  医療法人徳洲会札幌東徳洲会病院付属臨床研究センター, その他部局等, その他 (30400089)
藤谷 幹浩  旭川医科大学, 医学部, 准教授 (80322915)
Project Period (FY) 2013-04-01 – 2017-03-31
Keywordsバレット食道
Outline of Annual Research Achievements

conditional reprogramming法によるバレット食道細胞の分離・増幅とその特性検証;内視鏡検査を行い,バレット食道の診断が得られた症例から同時に生検組織材料を採取して,feeder細胞とROCK阻害剤を組み合わせた共培養を行い,BE初代細胞を増幅して継代可能な細胞株を樹立する試みを昨年度から継続して試行している.今のところ培養法の確立に至っていないため,検体の採取方法や培養に関する諸条件を調整中である.また,マウスの正常消化管を用いて同様に共培養の樹立を行っており,条件の調整と共に得られたサンプルの解析を行い評価している.
酸・胆汁酸負荷による分化マーカー,幹細胞経路への影響;バレット食道生検材料からの共培養が困難な場合に備えて,正常の扁平上皮細胞を不死化したHet-1Aの培養を開始した.胆汁酸負荷は既存の報告によって様々な条件が報告されているため,至適条件の設定を行っている.同様に既存のヒトバレット食道癌株(OE19,OE33)の培養も開始している.今後のシグナルなどの解析に備えてに備えてsiRNAの導入などの予備実験を行っていく予定である.

今年度はヒトバレット食道癌株(OE19,OE33;ECACCより購入)から得た幹細胞分画の解析を行い,共培養で得られた検体,またはHet-1Aから得られた検体とエピゲノムプロファイルを比較を行い,エピゲノム異常や幹細胞性シグナルの検証を行う.この結果を基に,シグナルの阻害により分化・増殖能への影響を検証する.

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

共培養については条件設定に予定より時間を要している.spheroid形成に問題があることから検体の採取法や処理法について検討中である.
さらに,多数の生検検体を多様な条件下で培養を試み用いて解析を進めていく.生検組織を採取する際により良い検体を得られる条件を検討していく.
共培養の樹立を中心に行ってきたが,期間内に樹立困難な場合を考えて,細胞株による検討を進めていく.

Strategy for Future Research Activity

共培養については検体量を含めて見直しを行い,条件設定を詰めていく.上手くいかない場合に備えて細胞株での検討も同時に行う.既存のバレット食道癌株(OE19,OE33;ECACCより購入)や不死化処理したした正常扁平上皮細胞株であるHet-1Aから得た幹細胞分画の解析を行い,共培養で得られた検体,またはHet-1Aから得られた検体とエピゲノムプロファイルを比較を行う.これらを用いてエピゲノム異常や幹細胞の分化制御に関わるWnt,Notch,BMP経路との関連を明らかにする.特に,扁平上皮から円柱上皮へのtransformationにBMP4が関わるとの報告をもとに,TGF-β経路幹細胞性シグナルの検証を行う.さらに,sphere cultureも試行してCD133/CD44陽性分画を評価することで幹細胞性を評価する.幹細胞性を認める場合には同様に比較検討する.これらの結果を基に,阻害薬やsiRNAなどを用いたシグナルの阻害により分化・増殖能への影響を検証する.これらによって,新規予防・治療ターゲットの探索や分化誘導療法への応用を試みる.
より多くの生検検体の解析を進めていく.生検組織を採取する際により良い検体を得られる条件を検討していく.

  • Research Products

    (12 results)

All 2015 2014

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (7 results)

  • [Journal Article] Efficacy and adverse events of EMR and endoscopic submucosal dissection for the treatment of colon neoplasms: a meta-analysis of studies comparing EMR and endoscopic submucosal dissection.2015

    • Author(s)
      Fujiya M, Tanaka K, Dokoshi T, Tominaga M, Ueno N, Inaba Y, Ito T, Moriichi K, Kohgo Y.
    • Journal Title

      Gastrointest Endosc.

      Volume: 81 Pages: 583-95

    • DOI

      10.1016/j.gie.2014.07.034.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A randomized study on the effectiveness of prophylactic clipping during endoscopic resection of colon polyps for the prevention of delayed bleeding.2015

    • Author(s)
      Dokoshi T, Fujiya M, Tanaka K, Sakatani A, Inaba Y, Ueno N, Kashima S, Goto T, Sasajima J, Tominaga M, Ito T, Moriichi K, Tanabe H, Ikuta K, Ohtake T, Kohgo Y.
    • Journal Title

      Biomed Res Int.

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1155/2015/490272.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Polyphosphate, an active molecule derived from probiotic Lactobacillus brevis, improves the fibrosis in murine colitis.2015

    • Author(s)
      Kashima S, Fujiya M, Konishi H, Ueno N, Inaba Y, Moriichi K, Tanabe H, Ikuta K, Ohtake T, Kohgo Y.
    • Journal Title

      Transl Res.

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1016/j.trsl.2015.02.002.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Intraductal cholangioscopic visualization of moving Fasciola hepatica.2015

    • Author(s)
      Fujibayashi S, Goto T, Sasajima J, Utsumi T, Dokoshi T, Sakatani A, Tanaka K, Nomura Y, Ueno N, Kashima S, Inaba Y, Moriichi K, Fujiya M, Kohgo Y.
    • Journal Title

      Gastrointest Endosc.

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1016/j.gie.2014.12.014.

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Decreased numbers of vascular networks and irregular vessels on narrow-band imaging are useful findings for distinguishing intestinal lymphoma from lymphoid hyperplasia.2014

    • Author(s)
      Fujiya M, Kashima S, Ikuta K, Dokoshi T, Sakatani A, Tanaka K, Ando K, Ueno N, Tominaga M, Inaba Y, Ito T, Moriichi K, Tanabe H, Saitoh Y, Kohgo Y.
    • Journal Title

      Gastrointest Endosc.

      Volume: 80 Pages: 1064-71

    • DOI

      10.1016/j.gie.2014.03.030.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] バレット食道表在癌の臨床的検討2014

    • Author(s)
      内海 辰哉,盛一健太郎,藤谷幹浩,田中一之,坂谷 慧,堂腰達矢,藤林周吾,安藤勝祥,上野伸展,嘉島 伸,後藤拓磨,笹島順平,稲場勇平,伊藤貴博,高後 裕
    • Organizer
      日本消化器関連学会週間(JDDW 2014)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2014-10-23 – 2014-10-26
  • [Presentation] Quantitative autofluorescence imaging is useful for assessing the severity of ulcerative colitis2014

    • Author(s)
      Moriichi K, Fujiya M, Ijiri M, Tanaka K, Sakatani A, Doukoshi T, Ando K, Ueno N, Kashima S, Inaba Y, Ito T, Kohgo Y.
    • Organizer
      United European Gastroenterology Week 2014
    • Place of Presentation
      Vienna
    • Year and Date
      2014-10-18 – 2014-10-22
  • [Presentation] A probiotic-derived polyphosphate improves the fibrosis in a murine model of chronic colitis via the regulation of inflammation- and fibrosis-associated mediators.2014

    • Author(s)
      Fujiya M, Konishi H, Ueno N, Inaba Y, Moriichi K, Kohgo Y.
    • Organizer
      GI Research Academy 2014
    • Place of Presentation
      Tokyo
    • Year and Date
      2014-06-06 – 2014-06-06
  • [Presentation] 潰瘍性大腸炎の活動性評価における自家蛍光内視鏡検査の有用性2014

    • Author(s)
      盛一健太郎,藤谷幹浩,高後 裕
    • Organizer
      第87回日本消化器内視鏡学会総会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      2014-05-15 – 2014-05-17
  • [Presentation] Long-term oral dietary administration of a new probiotic, Lactobacillus brevis SBC8803, alters gut the microbiota and ameliorates DSS-induced colitis in mice.2014

    • Author(s)
      Ueno N, Fujiya M, Segawa S, Konishi H, Sakatani A, Tanaka K, Dokoshi T, Ando K, Kashima S, Inaba Y, Ito T, Moriichi K, Shigyo T, Kohgo Y.
    • Organizer
      DDW 2014
    • Place of Presentation
      Chicago
    • Year and Date
      2014-05-03 – 2014-05-06
  • [Presentation] Comparison of the efficacy and adverse events of endoscopic mucosal resection and submucosal dissection for the treatment of colon neoplasms –Based on the results of our institute experience and a meta-analysis of comparative studies2014

    • Author(s)
      Tanaka K, Fujiya M, Dokoshi T, Tominaga M, Ueno N, Inaba Y, Ito T, Moriichi K, Kohgo Y.
    • Organizer
      DDW 2014
    • Place of Presentation
      Chicago
    • Year and Date
      2014-05-03 – 2014-05-06
  • [Presentation] Usefulness of NBI for differentiating colon neoplasms from non-neoplasms: Based on results of our institutional experience and a meta-analysis of comparative studies.2014

    • Author(s)
      Sakatani A, Fujiya M, Tanaka K, Dokoshi T, Fujibayashi S, Ando K, Ueno N, Goto T,Kashima S, Sasajima J, Inaba Y, Ito T, Moriichi K, Sato R, Kohgo Y.
    • Organizer
      DDW 2014
    • Place of Presentation
      Chicago
    • Year and Date
      2014-05-03 – 2014-05-06

URL: 

Published: 2016-05-27  

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