2013 Fiscal Year Research-status Report
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25460934
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
五艘 行信 北里大学, 医学部, 准教授 (20112659)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ムチン / 糖鎖 / グライコーム / 胃粘膜 / 粘液 / 質量分析計 |
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| Research Abstract |
当初の計画に基づいて，マウス胃の体部および幽門部からムチンを抽出，精製後，糖鎖を調整し，両者の違いについて質量分析計を用いて詳細に解析した。
具体的には，C57BL/6，オス，７週齢のマウスの胃粘膜をトライトンX-100およびジチオスレイトールを含むグアニジン塩酸溶液で抽出し，抽出液をゲルろ過カラム，塩化セシウム密度勾配超遠心により処理し，精製ムチンを得た。エタノール沈殿で脱塩後，水素化ホウ素ナトリウムの存在下でアルカリ分解して糖鎖を得，イオン交換カラムにより，中性糖鎖と酸性糖鎖に分画した。得られた糖鎖を，完全メチル化後，マトリックス支援飛行時間型質量分析計(MALDI-TOF-MS)を用いて解析した。
その結果，胃体部と幽門部では，胃ムチンの中性糖鎖に，サイズ分布の違いが見られることがわかった。しかし，糖鎖分子種には大きな違いは認められなかった。一方，酸性糖鎖については，胃体部にほとんど認められないのに対し，幽門部では有意に多い糖鎖が認められた。構造については，現在解析中である。
もう一つの予定項目であるムチン糖鎖プローブについては，蛍光標識糖鎖の調製法の予備的な検討を行った。未だ確立はしていないが，調製法について，今後に期待を抱かせる結果が出つつある。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の計画における目標が，おおむね達成された。
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| Strategy for Future Research Activity |
得られた部位特異的な糖鎖について，更なる詳細な構造解析を行う。
ムチン糖鎖プローブの作成については，調製法を確立する。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
極めて少額のため，更なる物品の購入はしなかった。
物品費として使用する。
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