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2014 Fiscal Year Research-status Report

胃粘膜恒常性維持におけるムチン糖鎖の役割の解明

Research Project

Project/Area Number 25460934
Research InstitutionKitasato University

Principal Investigator

五艘 行信  北里大学, 医学部, 准教授 (20112659)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2017-03-31
Keywordsムチン / 糖鎖 / グライコーム / 胃粘膜 / 粘液 / 質量分析計 / ヒドラジン処理 / ピーリング
Outline of Annual Research Achievements

当初の計画に基づいて,ムチン糖鎖プローブの開発を行った。具体的には,還元末端が還元性を保持している糖鎖の調製法の検討を行った。モデル糖タンパク質として,市販の豚胃ムチンを部分精製したもの,および子牛血清フェツインを用いた。ムチン糖鎖の切り出し条件として,当初の計画に基づいて,気相でのヒドラジンによる処理を採用し,同時に起こる分解(ピーリング)の抑制条件を検討した。その結果,弱酸であるマロン酸を反応系に添加するとピーリングが抑制されることを見いだした。糖鎖の切り出し反応条件について詳細に検討し,10μモルが至適量であることがわかった。また,マロン酸以外の弱酸にも同じ抑制効果があるが,マロン酸が最も効果的であることも見いだした。
この方法が,ラット胃ムチンの糖鎖に応用できるかを検討したところ,マロン酸を加えない反応条件では,ほとんどの生成物が分解産物であったのに対し,マロン酸を加えた場合には,多くの分解無しの糖鎖が得られることが明らかになった。
以上の結果は,これまで困難とされてきた、還元性を保持するムチン型糖鎖が調製可能になったことを示す。この成果を基に,糖鎖の異性体分離など,今後の検討課題を遂行する予定である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の計画における目標の1つが,おおむね達成された。

Strategy for Future Research Activity

糖鎖の異性体分離など,検討課題を遂行し,糖鎖プローブの作成法を完成させる。次に,得られた糖鎖プローブを用いた解析を行う。

Causes of Carryover

今年度購入予定の機器が,大学向けサービスキャンペーンによって前年度に購入できたため余裕が生じた。また,予定していた論文投稿が次年度になった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

論文作成費用(英文校正,投稿料)および,物品費として使用予定である。

  • Research Products

    (4 results)

All 2015 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (2 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Induction of Sda-sialomucin and sulfated H-sulfomucin in mouse small intestinal mucosa by infection with parasitic helminth.2015

    • Author(s)
      Tsubokawa D, Ishiwata K, Goso Y, Yokoyama T, Kanuka H, Ishihara K, Nakamura T, Tsuji N.
    • Journal Title

      Exp. Parasitol.

      Volume: 153 Pages: 165-173

    • DOI

      10.1016/j.exppara.2015.03.008.

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] マウス胃体部と幽門部におけるムチン糖鎖の違いの検討2014

    • Author(s)
      五艘行信,石原和彦,栗原 誠
    • Organizer
      第87回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      国立京都国際会館(京都市左京区)
    • Year and Date
      2014-10-16
  • [Presentation] ラット小腸ムチン分子種を識別するモノクローナル抗体2014

    • Author(s)
      小坂 裕, 飯田 泰広, 川島 麗, 五艘 行信, 石原 和彦, 市川 尊文, 栗原 誠
    • Organizer
      第87回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      国立京都国際会館(京都市左京区)
    • Year and Date
      2014-10-16
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 無水ヒドラジンによる,糖タンパク質からのO-結合型糖鎖のβ脱離反応における,脱離した糖鎖の分解抑制剤,キット及び方法2014

    • Inventor(s)
      五艘行信
    • Industrial Property Rights Holder
      五艘行信
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      特願2014-114916
    • Filing Date
      2014-06-03

URL: 

Published: 2016-05-27  

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