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2015 Fiscal Year Research-status Report

胃粘膜恒常性維持におけるムチン糖鎖の役割の解明

Research Project

Project/Area Number 25460934
Research InstitutionKitasato University

Principal Investigator

五艘 行信  北里大学, 医学部, 准教授 (20112659)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2017-03-31
Keywordsムチン / 糖鎖 / グライコーム / 胃粘膜 / 粘液 / 質量分析計 / ヒドラジン処理 / ピーリング
Outline of Annual Research Achievements

前年度に見いだした,ヒドラジンとマロン酸を用いた,分解抑制条件下でのムチン糖鎖切りだし条件の検討を更に行った。すなわち,モデル糖タンパク質として,子牛フェツインと豚胃ムチンを用いてのヒドラジン処理における,気相と液相の比較実験,必要マロン酸量の確認実験,マロン酸以外の弱酸の影響の確認実験などである。十分な再現性を認め,成果を論文としてまとめ,印刷,公表されるに至った。
その結果を基に,さらに分解の少ない条件の検討を行い,10 μmolマロン酸の存在下,60℃,6時間の気相ヒドラジン処理が,収量は落ちるものの,グライコーム解析には適していることを明らかにした。
更に,得られた還元末端が還元性を保持している糖鎖を用いて,プレートへの結合条件の検討を行った。しかし,未だ十分な系を確立するには至らず,検討中である。また,現在得られている糖鎖は単体とは言い難く,複数のHPLCを組み合わせて異性体を分離するという当初の課題についても検討を始めたところである。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

前年度までに見いだしたムチン糖鎖を分解抑制下で調製する方法を論文としてまとめるに当たり,さらなる確認実験を重ねたために時間を要したが,印刷,公表されるに至った。このため,次の課題としていた糖鎖の異性体分離の開始が遅れたが,得られた糖鎖をプレート上に固定化する予備実験を行うなど,新たな取り組みもできたので,標記の進捗状況とした。

Strategy for Future Research Activity

糖鎖の異性体分離など,残された検討課題を遂行し,当初予定した糖鎖プローブの作成を完成させる。ノックアウト実験が行えるマウスの胃粘膜を用いて,体部と幽門部のムチン糖鎖の違いを明らかにし,論文としてまとめる。

Causes of Carryover

前年度購入予定機器が,大学向けサービスキャンペーンによって初年度に購入できたため余裕が生じ,その分を今年度に繰り越しできたため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

論文作成費用(英文校正,投稿料)および,物品費として使用予定である。

  • Research Products

    (6 results)

All 2016 2015 Other

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Remarks (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results) (of which Overseas: 1 results)

  • [Journal Article] Malonic acid suppresses mucin-type O-glycan degradation during hydrazine treatment of glycoproteins.2016

    • Author(s)
      Goso Y
    • Journal Title

      Anal. Biochem.

      Volume: 496 Pages: 35-42

    • DOI

      10.1016/j.ab.2015.12.011.

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] ラット唾液ムチンを認識するモノクローナル抗体の作製2015

    • Author(s)
      合田瑞紀, 飯田泰広, 門谷裕一, 川島 麗, 五艘行信, 石原和彦, 市川尊文, 栗原 誠
    • Organizer
      第88回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場(神戸市中央区)
    • Year and Date
      2015-12-03
  • [Presentation] 無水ヒドラジンによるムチン型糖鎖切りだしに及ぼす弱酸添加の影響2015

    • Author(s)
      五艘行信
    • Organizer
      第88回日本生化学会大会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場(神戸市中央区)
    • Year and Date
      2015-12-02
  • [Presentation] Malonic acid suppresses O-glycan degradation during hydrazine treatment of glycoproteins.2015

    • Author(s)
      Yukinobu Goso
    • Organizer
      23rd International Symposium on Glycoconjugates
    • Place of Presentation
      スプリット(クロアチア)
    • Year and Date
      2015-09-17
    • Int'l Joint Research
  • [Remarks] 消化管粘液のバリアーとしての機能解析を目指して

    • URL

      http://web.med.kitasato-u.ac.jp/edures/biochem/GI-tract-mucin.html

  • [Patent(Industrial Property Rights)] 無水ヒドラジンによる,糖タンパク質からのO-結合型糖鎖のβ脱離反応における,脱離した糖鎖の分解抑制剤,キット及び方法2015

    • Inventor(s)
      五艘行信
    • Industrial Property Rights Holder
      五艘行信
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      PCT/JP2015/065865
    • Filing Date
      2015-06-02
    • Overseas

URL: 

Published: 2017-01-06  

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