誘導がん幹細胞の大量増幅と、HSP結合抗原パルス樹状細胞による個別化がん免疫誘導

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25460966
• Research Institution: Center for Clinical and Biomedical Research, Sapporo Higashi Tokushukai Hospital
• Principal Investigator: 蘆田 知史 医療法人徳洲会札幌東徳洲会病院付属臨床研究センター, IBD研究部, 研究員 (50261409)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 水上 裕輔 医療法人徳洲会札幌東徳洲会病院付属臨床研究センター, 臨床生体情報解析部, 部門長 (30400089) ; 井内 康之 医療法人徳洲会札幌東徳洲会病院付属臨床研究センター, その他部局等, 研究員 (90640615) [Withdrawn]
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 初代培養 / 癌 / 個別化医療

Outline of Annual Research Achievements

大腸癌および膵癌の切除材料を用いて、Conditional Reprogramming法（Xuefeng Liu, Am J Pathol 180, 2012）による初代腫瘍細胞の継代・増幅を試みた。腫瘍組織の処理は、大阪成人病センターの井上らの研究グループが考案したcancer tissue-originated spheroids (CTOS)法に準じて、間質混入の少ない上皮細胞間の細胞接着が維持されたorganoidを分離し、これを不活化したfeeder細胞上に播種・継代する2段階方式をとった。
継代中の細胞よりゲノムDNAを抽出し、次世代シーケンサ（Ion Torrent PGM）を用いて代表的ながん関連遺伝子の変異プロファイルを得た。driver変異をはじめとする比率は継代において変化することから、これら培養細胞が複数の異なるクローンから構成されることが想定され、heterogenoityを包括した培養細胞であると考えられた。さらに、これらをNOGなどの免疫不全マウスへ移植することで、細胞を採取した原発巣と同様の組織構築が得られ、in vivoにおける微小環境が忠実に再現しうることが示された。すなわち、このようにして得た患者初代腫瘍細胞ならびに増幅細胞群は、少なくとも特定の培養環境下で、継代数を一定レベルに制御することで、がん個別化医療におけつ癌抗原、あるいは薬剤感受性検査のため優れたリソースとなる可能性が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Tracking the clonal evolution of adenosquamous carcinoma, a rare variant of intraductal papillary mucinous neoplasm of the pancreas. (2016)
  • Author(s): Matsuzaka S, Karasaki H, Ono Y, Ogata M, Oikawa K, Tamakawa S, Chiba S, Muraki M, Yokochi T, Funakoshi H, Kono T, Nagashima K, Mizukami Y.
  • Journal Title: Pancreas Volume: xx Pages: xx-xx
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The protein expression level of Gli2 is a feasible marker of ligand-dependent hedgehog activation in pancreatic neoplasms. (2016)
  • Author(s): Sugiyama Y, Sasajima J, Mizukami Y, Koizumi K, Kawamoto T, Karasaki H, Yusuke Ono, Tanabe H, Fujiya M, Kohgo Y.
  • Journal Title: Pol J Pathol Volume: xx Pages: xx-xx
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A Rare Case of Epidermoid Cyst in the Pancreatic Tail Invaginated from the Splenic Hilum: Long-term Alteration in Imaging Findings. (2016)
  • Author(s): Sugiyama Y, Kawamoto T, Sasajima J, Koizumi K, Karasaki H, Mizukami Y.
  • Journal Title: Internal Medicine Volume: xx Pages: xx-xx
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Plasma DNA genotyping using digital PCR for early detection of pancreatic neoplasm (2015)
  • Author(s): Mizukami Y, Ono Y, Karasaki H, Ogata M, Koizumi K, Ando K, Yokochi T, Yamada M, Kono T, Nagashima K
  • Organizer: 46th Annual Meeting of the American Pancreatic Association
  • Place of Presentation: San Diego
  • Year and Date: 2015-11-04 – 2015-11-07
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 液体生検による膵癌リスク評価 (2015)
  • Author(s): 水上裕輔、真口宏介、小泉一也
  • Organizer: 第23回日本消化器関連学会週間
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-11
• [Presentation] Plasma DNA genotyping using digital PCR for early detection of pancreatic cancer (2015)
  • Author(s): Mizukami Y, Ono Y, Karasaki H, Asahara S, Ando K, Shinohara T, Nagashima K
  • Organizer: 第74回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [Presentation] 膵管内乳頭粘液性腫瘍より発生した膵腺扁平上皮癌 (2015)
  • Author(s): 小野裕介、唐崎秀則、千葉伸一、長嶋和郎、水上裕輔
  • Organizer: 第74回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10