2015 Fiscal Year Annual Research Report
腫瘍融解ワクシニアウイルスの肝癌幹細胞に対する殺細胞効果の評価
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25460975
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
安部井 誠人 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (20261802)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
永田 恭介 筑波大学, 学内共同利用施設等, その他 (40180492)
中村 幸夫 国立研究開発法人理化学研究所, その他部局等, その他 (60231479) [Withdrawn]
兵頭 一之介 筑波大学, 医学医療系, 教授 (60416469)
山下 太郎 金沢大学, 大学病院, 助教 (90377432)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 癌幹細胞 / 肝細胞癌 / 腫瘍融解ウイルス / ワクシニアウイルス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
現在、進行肝細胞癌に対しては分子標的薬（ソラフェニブ）や肝動注化学療法等による治療が行われているが、その効果には限界があり、新規治療の開発が待たれている。近年、腫瘍選択的に増殖し腫瘍を融解壊死させる腫瘍融解ウイルスが癌の遺伝子治療用の基盤ベクターとして注目されている。腫瘍融解ワクシニアウイルスJX-594は、Thymidine Kinase (TK)を欠損することにより正常細胞内では複製不能だが、腫瘍細胞内では腫瘍が産生するTKを利用して複製可能となり、腫瘍を融解壊死させ，肝癌に対する臨床試験において良好な成績を示している。癌の抗癌剤耐性には癌幹細胞(Cancer stem cell; CSC)の関与が知られているが，近年，腫瘍融解ウイルスのCSCに対する融解効果が報告されている。我々は，腫瘍融解ワクシニアウイルスJX-594が肝細胞癌のCSCに与える影響を検討することを目的とした。我々は，これまで肝細胞癌Li-7細胞株のCD13+CD166-分画がCSCの性質を持つことを明らかにし，Li-7細胞株が肝細胞癌の癌幹細胞を標的とする薬剤のスクリーニングに適していることを確認した。そこで，JX-594が肝細胞癌Li-7細胞株のCSCに及ぼす効果を検討した。はじめに，Li-7細胞株のCSC分画とnon-CSC分画におけるTKの発現を比較した。Li-7細胞を3次元培養し、Li-7 spheroidを作製した。3次元培養されたspheroid形成細胞には2次元培養した親細胞よりもCSC分画が多く含まれている。このLi-7 spheroid 形成細胞とbulk Li-7の全細胞タンパクをSDS-PAGEで泳動し、TKレベルをウエスタンブロット法で比較した。その結果、spheroid形成細胞にもbulk Li-7とほぼ同程度のTKの発現が確認された。以上の結果より、肝細胞癌Li-7株の癌幹細胞においてもJX-594の増殖は可能と考えられた。今後，JX-594ウイルスのLi-7細胞株のCSCに対する有効性を検証する予定である。
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