2013 Fiscal Year Research-status Report
タバコ抽出液によるラット肺気腫モデルにおける薬剤の抑制効果の検討
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25461185
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
花岡 正幸 信州大学, 医学部, 教授 (20334899)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安尾 将法 信州大学, 医学部附属病院, 講師 (20402117)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 肺気腫 / タバコ抽出液 / ラット / ピオグリタゾン / PPARγ |
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| Research Abstract |
最初に、タバコ抽出液（cigarette smoke extract; CSE）によるラット肺気腫モデルの作製に取り組んだ。ケンタッキー大学のリファレンスシガレット1本分の煙をリン酸緩衝液（PBS）1 mLに溶解させ、独自のシステムを用いてCSEを作製した。CSE 1 mLを週1回、第1、8、15日にオスSDラット（6週齢、体重200-250 g）の腹腔内へ投与し（n = 12）、第21日に麻酔下に肺組織を摘出した。Hematoxylin and eosin（HE）染色を行い、肺気腫の指標として、mean linear intercept（MLI）およびdestructive index（DI）を計算した。コントロールラット（PBSを腹腔内投与、n = 6）との比較では、MLIに有意差を認めたものの、DIはばらつきが大きく有意な差は得られなかった。すなわち、既報と異なり、気腔の拡大は有意であるが肺胞の破壊は明らかでなく、確実に肺気腫を再現することはできなかった。次に、このモデルにおいて、peroxisome proliferator-activated receptor（PPAR）γのアゴニストであるピオグリタゾンを用いた予備実験を行った。ピオグリタゾンは、低用量（1.0 mg/日、n = 6）あるいは高用量（2.5 mg/日、n = 7）を、第1日から第21日まで連日経食道的に投与した。その結果、高用量ピオグリタゾン群はコントロール群と比較し、MLIの有意な減少を認めたが、低用量群あるいはDIにおいては有意差を認めなかった。ピオグリタゾンの肺気腫抑制効果が期待できる結果ではあるが、肺気腫の形成が不十分と判断し、CSEの投与方法を変更したモデルの作製に取り掛かっている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
既報の方法では、タバコ抽出液（cigarette smoke extract; CSE）による肺気腫の形成が不十分なため、CSEの投与方法の変更を検討している。具体的には、CSEの投与回数の上乗せ、あるいは投与期間の延長が考えられる。ラットの肺気腫モデルを完成させた上で、各種薬剤の抑制効果の検討に入る予定である。このため、当初計画よりは達成度がやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
まず、タバコ抽出液（cigarette smoke extract; CSE）によるラットの肺気腫モデルを確立する。ケンタッキー大学のリファレンスシガレット1本分の煙をPBS 1 mLに溶解させ、CSEを作製する。従来法に加え、CSE 0.2 mLを5回/週、3週間にわたりオスSDラット（6週齢、体重200-250 g）へ腹腔内投与するモデル、およびCSE1.0 mLを1回/週、6週間にわたり同ラットへ腹腔内投与するモデルを作製する。最も気腫化が顕著であったモデルを用いて、ピオグリタゾン（PPARγアゴニスト）、次にシルデナフィル（選択的PDE-5阻害薬）の肺気腫抑制効果を検討する。ピオグリタゾンおよびシルデナフィルは、経食道的に連日投与する。3週あるいは6週後に肺組織を摘出し、組織学的検討、アポトーシスの検討、蛋白分解酵素の検討、炎症性サイトカインの検討、酸化ストレスの検討、肺構造維持プログラムの検討などを行い、CSE単独群と比較する。次年度は、特に肺の組織学的検討に重点を置き、それ以外の検討も逐次行っていく。
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Research Products
(1 results)
