2013 Fiscal Year Research-status Report

ナノ粒子によるクロスプレゼンテーション機構を利用した新規喘息ワクチン療法の開発

Research Project

Project/Area Number	25461186
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Research Institution	Hamamatsu University School of Medicine
Principal Investigator	榎本紀之浜松医科大学, 医学部附属病院, 助教 (50436961)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	須田隆文浜松医科大学, 医学部, 教授 (30291397)
Project Period (FY)	2013-04-01 – 2016-03-31
Keywords	気管支喘息 / ワクチン療法 / 樹状細胞 / クロスプレゼンテーション / ナノ粒子
Research Abstract	気管支喘息の病態においては樹状細胞(DC)が２型CD4陽性T細胞への抗原提示の中心的役割を担っている。我々はこの肺DCをCD8陽性T細胞(CTL)が抗原特異的に障害(killing)する事を報告した。今回の研究では喘息における肺DCをアレルゲン特異的に障害するCD8陽性T細胞を誘導するため、抗原タンパクによるDCワクチン療法を行う。また、DCのクロスプレゼンテーションを強力に促進し、アレルゲン特異的CD8陽性T細胞の誘導を強化するため、生分解性ポリマー(Polylactic coglycolic acid: PLGA)を用いたナノ粒子をアレルゲンタンパクと共に投与する。このPLGAとアレルゲンタンパクを用いたワクチン療法により、喘息による好酸球性気道炎症の改善を目的とする。今回の研究においては卵白アルブミン(OVA)誘導マウス喘息モデルを使用するが、OVAアレルゲンに対する免疫応答を検討するため、OVAのドミナントCTLエピトープ(SIINFEKL)に特異的なT細胞レセプターを有するOT-1マウスを輸入した。また、粒子径の異なる複数のPLGAを購入した。今後、PLGAによるDCのクロスプレゼンテーション促進効果について検討を進める予定である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 今回の研究では卵白アルブミン(OVA)誘導マウス喘息モデルを使用するが、OVAアレルゲンに対する免疫応答を検討するため、OVAのドミナントCTLエピトープ(SIINFEKL)に特異的なT細胞レセプターを有するOT-1マウスを輸入した。この特殊なマウスの輸入および搬入手続きに長時間を要した。
Strategy for Future Research Activity	今後は以下に記載の研究項目に沿って研究を実施する予定である。 ① In vitroにおいて、アレルゲン蛋白(卵白アルブミン: OVA)とナノ粒子(PLGA)を添加することによって、DCのクロスプレゼンテーション能を高め、アレルゲン特異的CD8陽性T細胞(CTL)を効率よく誘導できることをマウス骨髄由来樹状細胞(BMDC)を用いて確認する。 ② 次にin vivoにおいて、アレルゲン蛋白とPLGAを経気道的に投与し、アレルゲン特異的CTLが肺に誘導できることを確認する。 ③ マウス喘息モデルを用いて、アレルゲン蛋白とPLGAの経気道的投与が、アレルギー性気道炎症を抑制することを確認し、さらにこの抑制機構におけるクロスプレゼンテーションおよびアレルゲン特異的CTLの重要性を検討する。