2015 Fiscal Year Annual Research Report
IgA腎症の発症と進展におけるIgA糖鎖不全と責任B細胞の解明
Project/Area Number |
25461232
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Research Institution | Juntendo University |
Principal Investigator |
木原 正夫 順天堂大学, 医学部, 助教 (50512604)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鈴木 仁 順天堂大学, 医学部, 准教授 (10468572)
中田 純一郎 順天堂大学, 医学部, 助教 (20365638)
富野 康日己 順天堂大学, 医学部, 名誉教授 (60130077)
鈴木 祐介 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (70372935)
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Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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Keywords | IgA腎症 / 糖鎖不全IgA / ハイブリドーマ |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、IgA腎症の発症に関与していると考えられる糖鎖不全IgAとその責任B細胞の病的役割の解明を目的としている。これまでは、マウスIgAのヒンジ部O型糖鎖は存在しないとされてきたが、免疫グロブリン重鎖アロタイプ2a(Igh-2a)と2c(Igh-2c)を持つIgAにはO型糖鎖をもちうる構造であることが報告されている。これまでにIgh-2aをもつddYマウスの脾臓細胞を用いて、IgA産生ハイブリドーマを作製した。得られたいくつかのハイブリドーマから産生されるIgA分子のO型糖鎖について、IgA定常領域と可変領域のシークエンスを確認し、またアミノ酸シークエンスを行い、ヒンジ部においてセリン、スレオニンの有無を確認することで、O型糖鎖が存在しうると判断した。そのハイブリドーマを用いて正常マウスへの腹腔内投与を開始し、in vivoでIgA腎症が再現されるか確認した。一部のマウスで糸球体IgA沈着を確認したうえで、その病変・病勢の違いにより、疾患に関連する分子に差がないかについてreal-time PCRで検証を行ったが、現在のとこと明らかな分子に差が表れていない。今後も可能性のある様々な責任分子について検証の上、そのIgAを精製し、多量体/単量体IgAを分離し割合を確認するとともに、MALDI-TOF-MSにてO型糖鎖構造の分析を行う。疾患に関連する分子が特定し、その遺伝子導入したプラスミドを作製し、その分子をより高度に発現もしくは発現を低下させたハイブリドーマを作製し、再度in vivoで検証をしていきたい。
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