2014 Fiscal Year Research-status Report
GH-IGF1軸シグナル伝達の新展開―分子間相互作用の解明
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25461394
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| Research Institution | Wakayama Medical University |
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Principal Investigator |
京 雪楓 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 講師 (70316123)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
澤田 貴宏 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 非常勤講師 (00382325)
古島 謙亮 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 助教 (50392105)
坂口 和成 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 教授 (60178548)
宮嶋 正康 和歌山県立医科大学, 共同利用施設, 講師 (80137257)
新井 大貴 和歌山県立医科大学, 先端医学研究所, 学内助教 (90725574)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | Eph / ephrin / JAK2 / STAT5B / GHR / 分子間相互作用 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
EphA4、GHR、JAK2およびSTAT5Bの相互作用に関して研究を続けている。
EphA4はGHRをJAK2非依存性にリン酸化する：Jak2-KO fibroblastsを用いてEphA4およびGHRを強発現し、ephrinで刺激後のGHRリン酸化を調べると、60分ー180分をピークとして経時的にリン酸化が亢進した。JAK2はEphA4をリン酸化しないが、EphA4はJAK2をリン酸化する：GH刺激によって活性化されたJAK2がEphA4をリン酸化するかどうかを種々のEphA4 mutantsをHEK293T細胞で発現して調べたところ、この反応は起こらないことを発見した。また、同じ細胞にてEphA4およびGHRを強発現させ、ephrin-A1で刺激したところGHRのリン酸化が惹起された。GHR発現はEphA4によるSTAT5Bリン酸化に必須である：Jak2-KO fibroblastを用いてGhr shRNAにてGHRをknockdownしその影響を調べたところ、STAT5Bのリン酸化が低下した。Ghr-KO fibroblastではephrin-A1刺激はSTAT5Bのリン酸化を惹起しなかった。ephrin-A1による刺激はSTAT5Bの核内移行を促進する：Jak2-KO fibroblastを用いてephrin-A1で刺激し、経時的に細胞を取り出し、細胞質および核を分画することによってSTAT5Bの核内移行を調べた。60分をピークとして細胞質から核内に移行することが明らかとなった。
EphA4がIGF1産生に関与する臓器として、肝・筋肉・骨等が考えられる。これらの組織特異的にEphA4をKOした。単独ではKO効果はほとんど認められなかったが、これらの３臓器から同時にKOすると体格が小さくなった。骨特異的KOに関しては、骨形成・吸収に関わるFGF23や副甲状腺ホルモン（PTH）への作用も含めて現在検査中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
順調に進行している。
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| Strategy for Future Research Activity |
細胞レベルでの分子間相互作用をさらに追及する。
臓器レベルでのEphA4発現の作用をconditional KOマウスを用いて調べる。
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Research Products
(2 results)
