腎炎発症モデル抗ＤＮＡ抗体遺伝子ノックイン・マウスへの特異的治療アプローチ

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25461473
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 吉藤 元 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20422975)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 膠原病学

Outline of Annual Research Achievements

自ら開発したSLE動物モデルである「抗DNA抗体遺伝子ノックイン・マウス」はB6バックグラウンドであったので17か月かけてBalb/cバックグラウンドに改変した。本研究では、これらのSLE動物モデルにおいて「自己抗体産生B細胞」がどのように制御されているかを明らかにし、「自己抗体産生B細胞」を特異的に抑制するSLEの新治療法を目標としている。
前年度に「抗DNA抗体遺伝子ノックイン・マウス」にエストロゲンを投与し、脾臓のB細胞分画を調べたところ、自己反応性B細胞と関係が深い辺縁型B細胞（marginal zone B cell）の割合が増えるということをつかんでいた。当該年度は、抗DNA抗体産生B細胞のマウス体内での動態を解析した。Balb/cバックグラウンド(アロタイプa)の野生型マウスと、B6バックグラウンド(アロタイプb)の「抗DNA抗体遺伝子ノックイン・マウス」を交配したWT(a)/R4A(b)-F1マウスを作製した。このF1マウスでは、Balb/c野生型マウス由来のB細胞を抗IgM(a)抗体で、抗DNA抗体産生B細胞を抗IgM(b)抗体で識別することができる。WT(a)/R4A(b)-F1マウスの脾B細胞をフローサイトメトリーで解析したところ、IgM(b)陽性細胞（抗DNA抗体産生B細胞）が著減していた。marginal zone B cellを野生型B細胞と抗DNA抗体産生B細胞のいずれが占めるかを検討したところ、予想とは逆で、野生型B細胞由来のmarginal zone B cellが大きく増加していた。
今回の検討において、抗DNA抗体産生B細胞が著減していたことは、自己反応性のB細胞はクローン選択において排除されているためと考えられた。本モデルにおいてB細胞が選択・排除されているメカニズムをさらに調べることによりSLEの病態解析につながることが期待される。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当該年度の計画としていた、遺伝子改変マウスにおける自己抗体産生性B細胞の動態の解析を進めることができたため。

Strategy for Future Research Activity

疾患を引き起こすB 細胞の特性を知るために、Balb/cバックグラウンドの野生型マウスとB6バックグラウンドの「抗DNA抗体遺伝子ノックイン・マウス」を交配したWT(a)/R4A(b)-F1マウスにおける、IgM(b)陽性細胞（抗DNA抗体産生B細胞）の分布と遺伝子発現を解析する。
Balb/cバックグラウンドの「抗DNA抗体遺伝子ノックイン・マウス」B 細胞の発現遺伝子を、非発症マウス（WTマウス）B 細胞の発現遺伝子と比較することにより、SLE発症に重要な分子を検索する。
引き続き、主にマウスの飼育やgenotyping、フローサイトメトリー（抗体、消耗品）などに研究費を当てる。

Research Products

• [Journal Article] Human T cells expressing BEND3 on their surface represent a novel subpopulation that preferentially produces IL-6 and IL-8. (2014)
  • Author(s): Shiheido H, Kitagori K, Sasaki C, Kobayashi S, Aoyama T, Urata K, Oku T, Hirayama Y, Yoshitomi H, Hikida M, Yoshifuji H, Mimori T, Watanabe T, Shimizu J
  • Journal Title: Immun Inflamm Dis Volume: 2 Pages: 35-43
  • DOI: 10.1002/iid3.17
  • Peer Reviewed