潜因性ウエスト症候群家族内発症例の遺伝子解析研究

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25461542
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 石原 尚子 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (30393143)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 夏目 淳 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (60422771)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 潜因性West症候群 / 家族内発症 / 網羅的遺伝子解析

Research Abstract

West症候群は群発するスパズムとヒプスアリスミアを特徴とし、しばしば発達の停滞、退行を伴うてんかん性脳症である。このうち発症前に神経学的異常が無く、画像検査、生化学で異常を認めない潜因性West症候群の患者は全体の１～３割程度とされており、発症の原因および機序の同定に至っていない。名古屋大学医学部附属病院小児科は以前から潜因性West症候群の臨床研究を行っており、愛知県のみならず近隣からも患者が来院するため、症例の蓄積が豊富である。今回、潜因性West症候群の家系内発症例の遺伝的要因を検索するため、２家系において次世代シークエンス解析を施行した。
1家系目は兄弟発症の家系で、父・母・同胞の３名を含む５名の血液検体を用いて、次世代シークエンス解析を行った。10万以上のSNV（single nucleotide polymorphism）のうち、チャネル関連遺伝子、てんかん関連遺伝子を含む325遺伝子パネルを作成し、エクソン上の蛋白変化を伴う変異について、発症者に共通する突然変異、ホモ接合変異、compound hetero変異、X-linked変異を検索した。このうちでデータベース上の頻度の低いX-linked のSNVを認めた。現在はさらにパネル上の候補遺伝子を広げ、再度検索を行っている。
2家系目は母子発症の家系で、発症児の父・同胞の２名を含む４名の血液検体を用いて、同じく次世代シークエンス解析を行った。先述した遺伝子パネルを用い、発症者２名に共通する７つの遺伝子に病原性を疑うSNVを認め、現在さらなる解析を行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

対象とした2家系について、次世代シークエンサーを用いた網羅的解析を施行した。現在、バイオインフォマティクス解析にて候補遺伝子を絞り込む作業を継続している。得られたデータから候補遺伝子を絞り込む作業が難渋しているため、サンガー法を用いた変異確認には至っていない。

Strategy for Future Research Activity

バイオインフォマティクス解析による候補遺伝子の絞り込みと、サンガー法を用いた変異確認を施行する。遺伝子変異を同定した後、その変異タンパクの機能解析を行い、病気の発症との関連を検討する。また同様の臨床型を有する弧発例についても候補遺伝子における変異解析を施行する。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

本研究計画は3年間で計画している。初年度は次世代シークエンサーを用いた2家系の網羅的遺伝子解析を行ったが、候補遺伝子の絞り込みに時間を費やしたため、変異確定に必要なサンガーシークエンス、さらに弧発例の解析には着手できていない状況である。これらの解析を次年度以降に行う予定である。
候補遺伝子の絞り込みを行った後、サンガーシークエンス解析にて変異の確定を行う予定である。さらに、弧発例における同遺伝子の変異解析、機能解析を行っていく予定である。これらの解析にはさらに研究費を必要とする。

Research Products

• [Journal Article] PET in Infancy Predicts Long-Term Outcome during Adolescence in Cryptogenic West Syndrome (2014)
  • Author(s): J. Natsume, N. Maeda, K. Itomi, H. Kidokoro, N. Ishihara, H. Takada, A. Okumura, T. Kubota, K. Miura, K. Aso, T. Morikawa, K. Kato, T. Negoro, and K. Watanabe
  • Journal Title: AJNR Am J Neuroradiol Volume: in press Pages: in press
  • Peer Reviewed
• [Presentation] TBSS analysis of diffusion tensor imaging in cryptogenic West syndrome : Comparison with PET hypometabolism. (2013)
  • Author(s): Natsume J, Ogawa C, Fukasawa T, Yamamoto H, Kidokoro H, Yokoi S, Takeuchi T, Azuma Y, Ishihara N, Ando N, Kubota T, Negoro T, Watanabe K.
  • Organizer: 67th annual meeting of the American Epilepsy Society.
  • Place of Presentation: Washington D.C., USA
  • Year and Date: 20131206-20131212
• [Presentation] Diffusion tensor imaging in cryptogenic West syndrome : Tract-based spatial statistics analysis at onset. (2013)
  • Author(s): Ogawa C, Natsume J, Fukasawa T, Yamamoto H, Kidokoro H, Yokoi S, Takeuchi T, Azuma Y, Ishihara N, Ando N, Kubota T, Negoro T, Watanabe K.
  • Organizer: 67th annual meeting of the American Epilepsy Society.
  • Place of Presentation: Washington D.C., USA
  • Year and Date: 20131206-20131212
• [Presentation] Diffusion tensor imaging in cryptogenic West syndrome. (2013)
  • Author(s): Natsume J.
  • Organizer: 第47回日本てんかん学会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場（北九州市）
  • Year and Date: 20131011-20131012
  • Invited
• [Presentation] 潜因性West症候群の拡散テンソル画像とFDG-PET所見の比較 (2013)
  • Author(s): 夏目淳、深沢達也、小川千香子、山本啓之、竹内智哉、横井摂理、石原尚子、東慶輝、城所博之、三浦清邦、安藤直樹、久保田哲夫、根来民子、渡邊一功
  • Organizer: 第47回日本てんかん学会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場（北九州市）
  • Year and Date: 20131011-20131012
• [Presentation] Diffusion tensor imaging in cryptogenic West syndrome : Tract-based spatial statistics analysis at onset. (2013)
  • Author(s): Ogawa C, Natsume J, Ishihara N, Kidokoro H, Azuma Y, Yokoi S, Yamamoto H, Takeuchi T, Miura K, Negoro T, Watanabe K.
  • Organizer: 第47回日本てんかん学会
  • Place of Presentation: 北九州国際会議場（北九州市）
  • Year and Date: 20131011-20131012
• [Presentation] The difference of side effects according to age during ACTH therapy (2013)
  • Author(s): Naoko Ishihara, Jun Natsume, Chikako Ogawa, Tomoya Takeuchi, Hiroyuki Yamamoto, Yoshiteru Azuma, Hiroyuki Kidokoro, Kiyokuni Miura, Tamiko Negoro, Kazuyoshi Watanabe
  • Organizer: 30th International epilepsy Congess
  • Place of Presentation: Montreal, Canada
  • Year and Date: 20130623-20130627
• [Presentation] FDG-PET in infancy predicts long-term outcome during adolescence in cryptogenic West syndrome. (2013)
  • Author(s): Natsume J, Maeda N, Itomi K, Ishihara N, Okumura A, Kubota T, Miura K, Aso K, Morikawa T, Kato K, Negoro T, Watanabe K.
  • Organizer: 30th International Epilepsy Congress.
  • Place of Presentation: Montreal, Canada
  • Year and Date: 20130623-20130627
• [Presentation] 結節性硬化症に伴うWest症候群におけるACTH療法の有用性の検討 (2013)
  • Author(s): 石原尚子、夏目淳、東慶輝、中田智彦、丸山幸一、三浦清邦、根来民子、渡邊一功
  • Organizer: 第55回日本小児神経学会学術集会
  • Place of Presentation: iichiko総合文化センター（大分市）
  • Year and Date: 20130530-20130601
• [Presentation] 潜因性West症候群において生後10カ月のFDG-PET所見は青年・成人期の発達予後予測に有用である。 (2013)
  • Author(s): 夏目淳、前田規秀、糸見和也、奥村彰久、久保田哲夫、三浦清邦、麻生幸三郎、森川建基、根来民子、渡邊一功
  • Organizer: 第55回日本小児神経学会学術集会
  • Place of Presentation: iichiko総合文化センター（大分市）
  • Year and Date: 20130530-20130601
• [Book] 「てんかん症候群分類の考え方」子どものけいれん・てんかん-見つけ方・見分け方から治療戦略へ- (2013)
  • Author(s): 夏目 淳、奥村彰久、浜野晋一郎、渡邊一功、根来民子、斎藤義朗、松尾宗明、丸山幸一、鈴木基正、白石秀明、森 墾、桂 正樹、國松 聡、安部信平、山本俊至、齋藤伸治、諸岡輝子、岡 牧郎、秋山倫之、久保田哲夫、他18名
  • Total Pages: 268(19-24)
  • Publisher: 中山書店
• [Book] 「PET」子どものけいれん・てんかん-見つけ方・見分け方から治療戦略へ- (2013)
  • Author(s): 夏目 淳、奥村彰久、浜野晋一郎、渡邊一功、根来民子、斎藤義朗、松尾宗明、丸山幸一、鈴木基正、白石秀明、森 墾、桂 正樹、國松 聡、安部信平、山本俊至、齋藤伸治、諸岡輝子、岡 牧郎、秋山倫之、久保田哲夫、他18名
  • Total Pages: 268(83-88)
  • Publisher: 中山書店
• [Remarks] 名古屋大学小児科 研究室紹介 小児神経グループ
  • URL: http://www.med.nagoya-u.ac.jp/ped/laboratoryNerve.html