2015 Fiscal Year Annual Research Report
ips細胞およびAAVベクターを用いた先天性副腎皮質過形成の遺伝子治療の開発
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25461575
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| Research Institution | National Center for Child Health and Development |
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Principal Investigator |
内木 康博 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, その他部局等, その他 (20470007)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
勝又 規行 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, その他部局等, その他 (10260340)
深見 真紀 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, その他部局等, その他 (40265872)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 副腎皮質過形成症 / 遺伝子治療 / アデノウィルス随伴ウィルスベクター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は21水酸化酵素欠損症のモデルマウス(Cyp21a1欠損マウス)を用い、非侵襲的な遺伝子治療を確立することであった。昨年度までの研究でCyp21a1欠損の成獣マウス4個体に対してCyp21a1遺伝子を含む血清型2型のアデノウィルス随伴ウィルス(AAV)ベクターを筋肉内に投与して血液中のプロゲステロン(P4)が、RVベクターでCyp21a1遺伝子を発現させた線維芽細胞を自家移植した場合より効率よくDOCに代謝される事を確認した。
本年度はAAVベクターによってCyp21a1遺伝子を筋肉内に発現させたマウスの血液中のプロゲステロンからDOCへの改善をさらに個体を増やして確認することと、1回の投与によって長期的な経過を観察している途中である。
またCyp21a1遺伝子は本来副腎皮質で発現し活性を生じることより筋肉内投与との有効性を比較するためAAVベクターを直接Cyp21a1欠損マウス副腎へ投与して血清中のプロゲステロン/DOC比を測定したが代謝は改善されなかった。このことより少なくとも副腎内へ遺伝子を導入する目的には今回用いた血清型2型のAAVベクターは適さないことを確認した。
さらに人において21水酸化酵素欠損症についで頻度の高い11β水酸化酵素欠損症においても同等の治療効果が期待できるか否か、11β水酸化酵素をコードするCYP11B1遺伝子を含んだ血清型2型のAAVベクターを作成した。これを11β水酸化酵素欠損症の患者の皮膚から初代培養して得られた線維芽細胞に感染させて遺伝子を導入したところ、培養液中のDOCからcorticosteroneへの変換を認めなかった。これは21水酸化酵素と違い11β水酸化酵素はミトコンドリア内で作用することからステロイド非産生細胞である線維芽細胞では活性が得られなかったと考えた。
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