小児のoccult HBV感染の病態解明と感染予防への応用

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25461625
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 伊藤 孝一 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (00444977)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 杉浦 時雄 名古屋市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10381881)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: B型肝炎 / 小児

Research Abstract

本邦ではHBV母子感染予防策としてHBIGとHBワクチンが投与されている。しかし、母子感染防止処置を完遂しても5％程度は母子感染が成立する。一方、Occult HBV感染については十分な調査がなされていない。本研究の目的はHBVキャリアーの母から出生した児におけるOccult HBV感染の頻度を明らかにすることである。
本研究では、2年間（平成24年度と25年度）を血液検体集積期間と位置づけている。平成24年度においては、後方視的検討として名古屋市立大学病院における小児Occult HBV感染の実態調査を行った。対象は当院にてHBV母子感染予防または父子感染予防を目的に、生後2，3，5ヶ月にHBVワクチンが接種され、2004年1月以降に当院にてHBs抗体価および、HBc抗体価が測定された小児である。対象は62例（男41　女21）。全例において、生後6カ月以降にHBs抗体の陽性が確認された。1例（1.6％）において、HBc抗体の持続陽性が確認された。該当症例のHBs抗体価およびHBc抗体抑制率を以下に示す。1歳時HBs抗体価　487 IU/ml　HBc抗体抑制率　32.7％、2歳時HBs抗体価　114 IU/ml　HBc抗体抑制率　28.0％、3歳時HBs抗体価　55.7 IU/ml　HBc抗体抑制率　31.3％、4歳時HBs抗体価　19.9 IU/ml　HBc抗体抑制率　33.6％、5歳時HBs抗体価　500 IU/ml　HBc抗体抑制率　95.5％、6歳時HBs抗体価　359 IU/ml　HBc抗体抑制率　89.5％。該当症例はHBs抗原は陰性であるため、Occult HBV感染に該当する。HBV母子感染予防実施例においてOccult HBV感染例が少ない頻度（1.6％）で存在することが確認された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本邦におけるHBV母子感染予防実施例におけるOccult HBV感染については十分な調査がなされておらず、その実態が不明であった。今回の調査において、小児のOccult HBV感染が少ない頻度（1.6％）で存在することを初めて明らかにすることができた。

Strategy for Future Research Activity

平成25年度も血液検体集積期間と位置づけ、HBV母子感染予防実施例の血液検体を収集する。血清からDNAを抽出し、HBV S領域、X領域、コア領域に設定した特異度の高いPCR用Primerを用い、Real-time PCR法にてHBV-DNAの検出を行う。直接シークエンス法により、HBV DNAの塩基配列を決定し、検出されたウイルスの遺伝子型を同定する。母子のウイルス株の塩基配列を比較検討する。分子系統樹を作成しウイルスの由来を推定するとともに、HBV DNAのPre Core領域、Core Promoter領域の遺伝子変異の有無などのウイルス要因のデータ収集を行う。HBV母子感染に関連する宿主側の遺伝子多型についてReal-time PCR法を用いて解析する。必要に応じてダイレクトシークエンス法を併用する。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

Real-time PCR装置の更新を予定していたが、購入予定機種が次年度以降にバージョンアップされるため、購入時期を遅らせることとした。本年度は現在使用中のReal-time PCR装置を継続使用することとした。
現在使用中のReal-time PCR装置は旧式であり、まれに不具合が生じることもあるため、次年度には更新が必要である。

Research Products

• [Journal Article] Viral Load Before and After Exchange Transfusion in a Neonate with Hyperbilirubinemia and Congenital Cytomegalovirus Infection (2014)
  • Author(s): Kei Ohashi, Koichi Ito, Takeshi Endo, Tokio Sugiura, Risa Awaya, Tatenobu Goto, Yoshiaki Nagaya, Hiroko Ueda, Rika Nagasaki, Takenori Kato, Shinji Saitoh
  • Journal Title: Journal of Clinical Case Reports Volume: 4 Pages: 343
  • DOI: 10.4172/2165-7920.1000343
  • Peer Reviewed