2013 Fiscal Year Research-status Report
甲状腺未分化癌の分子標的開発に向けたEpCAMの機能解析
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25461976
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
伊藤 研一 信州大学, 医学部, 准教授 (10334905)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 甲状腺癌未分化癌 / 癌のバイオロジー / 分子標的の探索 |
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| Research Abstract |
① これまでに甲状腺未分化癌細胞株2株と分化癌細胞株2株でEpCAM、CD44 standard form、CD44 variant form、およびclaudin-7の発現を比較解析した。フローサイトメトリーでの解析で、未分化癌細胞株では、EpCAMの発現増加とCD44 standard formの発現の低下を認めた。一方、CD44 variant formは、未分化癌細胞株でのみ発現が認められた。解析した甲状腺癌細胞株では、EpCAMとCD44 standard formとの発現に逆相関が認められた。蛍光二重染色での観察でも、甲状腺未分化細胞株でのEpCAM発現は、CD44 standard form低発現の細胞で認められた。一方、ALDH1酵素活性とEpCAM発現との間には、フローサイトメトリーでの解析で正の相関が認められ、蛍光二重染色での観察でも、EpCAMを発現している細胞で高いALDH1活性が認められた。
② ヒト臨床甲状腺癌組織の免疫組織染色の観察では、EpCAMは未分化癌の核での発現の増加を認め、CD44 variant formも未分化癌での発現増加が認められた。これらの結果から、EpCAMとその関連因子が未分化癌の悪性度に関与している可能性が考えられた。これまでに得られた結果をPLOS ONE誌に論文発表した（PLOS ONE. 9 (4): e94487, 2014）。
③ 上記の結果を受け、甲状腺未分化癌におけるEpCAMの機能を解析するために、siRNAを用いてその発現を低下させ、増殖やシグナル伝達に変化が起こるか現在解析を進めている。siRNAを用いたEpCAMの発現抑制には成功しており、現在解析を継続している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
これまでに得られた結果を国際誌に論文発表することができた。培養細胞を用いた実験では、一つずつ事象を確認しながら進めており、予想外の結果も得られているが、概ね順調に進んでいると考えられる。siRNAを用いた実験系が軌道に乗れば、解析がさらに進むと予想している。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでの解析で、甲状腺未分化癌において、EpCAMが何らかの役割を果たしていることが強く推測されている。しかし、EpCAMとCD44 variant formやclaudin-7が実際に複合体を形成しているか、また、EpCAMが未分化癌のどのような悪性度に関与しているのかに関しては未知のままである。また、培養細胞を用いた実験系で認められた事象が必ずしも臨床癌で認められていない点もある。そこで現在、siRNAによりEpCAMの発現をknock downした系での解析を進めている。また、EpCAMと関連する因子の相互作用に関しても解析を進めている。これらの解析を通して、EpCAMまたはその関連因子が、甲状腺未分化癌の分子標的として用いられる可能性を検討する。
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