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2013 Fiscal Year Research-status Report

分化能を有するII型肺胞上皮細胞による障害肺の改善-肺移植の臨床応用に向けて-

Research Project

Project/Area Number 25462172
Research InstitutionChiba University

Principal Investigator

吉田 成利  千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90334200)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 坂入 祐一  千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (30551949)
岩田 剛和  千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (30586681)
吉野 一郎  千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (40281547)
鈴木 秀海  千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (60422226)
鎌田 稔子  千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (60586692)
田川 哲三  千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90419557)
山本 高義  千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (20648349)
Project Period (FY) 2013-04-01 – 2017-03-31
Keywords肺移植 / 再生
Research Abstract

平成25年度の実験としては肺虚血障害モデル・死体肺移植モデルにおいて、単離・培養した2型肺胞上皮(ACE-II)細胞投与による組織学的変化、生着・増殖分布を捉え、再生能の可能性を探ることを主とする実験計画を行った。
まず、F344雌ラットによる左肺血流および換気を遮断する肺虚血モデルを作成し、再潅流を施行した。再潅流によって傷害を受けた気管支・血管周囲は浮腫になり、5型コラーゲン[col(V)]が暴露されるという潅流傷害を再確認した。そのモデルにおいて、同系雄ラットから単離・培養したACE-II細胞を経気道的に投与し、1カ月後に犠牲死させ、虚血潅流傷害を与えた肺について組織学的に検討した。HE染色および免疫組織化学染色によりACE-II細胞の生着と考えられる部位を確認した。
ACE-II細胞の培養を行い、純度の高いACE-II細胞に対し、Lipofectamineを使用してluciferaseをトランスフェクションする実験を試みている。また、cell lineを用いて、IVIS; Lumina-II(Xenogen / Caliper)による細胞の発光をwell上で測定する前実験を行い、ACE-II細胞に対して行えるように試みている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

実験施設の施設内整理などにより、本実験を行うにあたり実験室の整備が遅れてしまった。このため、培養などを用いた前実験を行いながら、動物実験室の整備を並行して行ってきた。また、トランスフェクションを行うにあたり、十分な細胞数を準備する必要があり、試行錯誤を重ねたため時間を要してしまった。

Strategy for Future Research Activity

今後、経気道的に投与したACE-II細胞の生着をY染色体発現によるFISH法で確認を行う。
また、ACE-II細胞に対してluciferineをトランスフェクションし、well上での確認と、正常ラットにおける尾静脈投与によるIVIS; Lumina-II(Xenogen / Caliper)を用いた分布を探る。さらに、肺虚血モデルにおいて同様の実験を行い、その分布を確認する。さらには肺移植モデルにおいても同様のことを行う。
続いて、26年度に計画していた実験を推進するにあたり、マウスモデルについて25年度実験計画と同様のことをマウスにおいて行う。マウス肺移植モデルは当施設では既に確立されており、当初の25年度計画の遅れを取り戻せば、順調に進むものと考えている。

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

実験施設の施設内整理などにより、本実験を行うにあたり実験室の整備が遅れてしまったことが最大の理由である。そのため、培養などを用いた前実験を行いながら、動物実験室の整備を並行して行ってきた。
実験室の整備が落ち着いてきたので、今後、経気道的に投与したACE-II細胞の生着をY染色体発現によるFISH法で確認を行う。また、ACE-II細胞に対してluciferineをトランスフェクションし、well上での確認と、正常ラットにおける尾静脈投与によるIVIS; Lumina-II(Xenogen / Caliper)を用いた分布を探る。さらに、肺虚血モデルにおいて同様の実験を行い、その分布を確認する。さらには肺移植モデルにおいても同様のことを行う。
続いて、26年度に計画していた実験を推進するにあたり、マウスモデルについて25年度実験計画と同様のことをマウスにおいて行う。マウス肺移植モデルは当施設では既に確立されており、当初の25年度計画の遅れを取り戻せば、順調に進むものと考えている。

  • Research Products

    (5 results)

All 2013 Other

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Increase of bone morphogenetic protein-7 expressing pulmonary resident cells in pneumonectomized rats.2013

    • Author(s)
      Ohba T, Wada H, Yoshino I, Yoshida S, Tagawa T, Shoji F, Yamazaki K, Maehara Y.
    • Journal Title

      Surg Today

      Volume: 44 Pages: 324-331

    • DOI

      10.1007/s00595-013-0604-7

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Role of complement activation in obliterative bronchiolitis post-lung transplantation.2013

    • Author(s)
      Suzuki H, Lasbury ME, Fan L, Vittal R, Mickler EA, Benson HL, Shilling R, Wu Q, Weber DJ, Wagner SR, Lasaro M, Devore D, Wang Y, Sandusky GE, Lipking K, Pandya P, Reynolds J, Love R, Wozniak T, Gu H, Brown KM, Wilkes DS.
    • Journal Title

      J Immunol.

      Volume: 191 Pages: 4431-4439

    • DOI

      10.4049/jimmunol.1202242

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 肺移植における慢性拒絶反応の病態解明と臨床応用への可能性

    • Author(s)
      鈴木秀海、吉田成利、豊田行英、尹 貴正、鎌田稔子、森本淳一、坂入祐一、山田義人、田川哲三、岩田剛和、溝渕輝明、千代雅子、Fan L、Wilkes DS、吉野一郎
    • Organizer
      第113回日本外科学会定期学術集会
    • Place of Presentation
      福岡
  • [Presentation] 肺移植後の慢性拒絶反応における液性免疫の関与

    • Author(s)
      鈴木秀海、吉田成利、中島崇裕、田川哲三、岩田剛和、溝渕輝明、吉野一郎
    • Organizer
      第49回日本移植学会総会
    • Place of Presentation
      京都
  • [Presentation] Donor lung derived myeloid and plasmacytoid dendritic cells differentially regulate T cell proliferation and cytokine production

    • Author(s)
      Suzuki H, Yoshida S, Sata Y, Inage T, Yun T, Yamamoto T, Kamata T, Morimoto J, Sakairi Y, Nakajima T, Tagawa T, Iwata T, Mizobuchi T, Wilkes DS, Yoshino I.
    • Organizer
      The 9th Lung Transplantation Conference
    • Place of Presentation
      仙台

URL: 

Published: 2015-05-28  

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