2015 Fiscal Year Annual Research Report
肺癌切除検体の肺静脈血に含まれるストローマ細胞の検出及び解析
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25462184
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
神山 育男 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (70317147)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河野 光智 東海大学, 医学部, 准教授 (10276272)
羽藤 泰 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (10365281) [Withdrawn]
後藤 太一郎 慶應義塾大学, 医学部, 共同研究員 (80317148) [Withdrawn]
鈴木 繁紀 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (80645672)
渡辺 真純 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90201227)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 肺癌 / 転移性肺腫瘍 / ストローマ細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究の目標は、マウスモデルで静脈血中に癌細胞とともに放出されるストローマ細胞を検出、解析する方法を確立することであった。具体的には、①赤色蛍光蛋白DsRedに標識されたマウス肺癌細胞株をGFPマウスの肺或いは腎臓に移植し、ストローマ細胞が緑色蛍光蛋白に標識された腫瘍を発育させる、②肺静脈或いは腎静脈にカニュレーションし、持続採血し、蛍光顕微鏡で癌細胞とストローマ細胞が収集されていることを確認する、③セルブロック法を用いて静脈血中の細胞を効率よく収集してパラフィンに包埋する、④ストローマ細胞のマーカーを用いて免疫染色し、収集された細胞の解析を行う、⑤転移能の異なる癌細胞株で比較し、検討する、ことである。平成26年度、マウス肺癌細胞株Lewis lung carcinoma(LLC) の肺への移植法を確立した。培養したLLCをマトリゲルに懸濁し肺内に注入し、生着させた。
平成27年度も引き続き実験モデルの確立の準備を行った。培養したLLCを肺内に注入し生着させる手技を安定するよう繰り返し行った。肺に移植したLLCが縦隔リンパ節に転移していることが確認できた。マウス肺癌細胞へのDsRedによる標識が確立できなかったことと、マウスの静脈血の量の少なさからセルブロックを作成することが困難であったため、目標とする解析まで至らなかった。研究期間中に達成できたことは、①に関しマウス肺癌細胞株を肺に移植し腫瘍を発育させる手技を確立したこと、②肺静脈にカニュレーションし持続採血する手技が安定したこと、である。今後も継続して手技の確立を目指す。
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[Journal Article] Prognostic impact of preoperative tumor marker levels and lymphovascular invasion in pathological stage I adenocarcinoma and squamous cell carcinoma of the lung.2015
Author(s)
Kinoshita T, Ohtsuka T, Yotsukura M, Asakura K, Goto T, Kamiyama I, Otake S, Tajima A, Emoto K, Hayashi Y, Kohno M.
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Journal Title
J Thorac Oncol.
Volume: 10(4)
Pages: 619-628
DOI
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