2015 Fiscal Year Annual Research Report
子宮内膜症の発症・進展における内膜幹細胞の役割とEMT/METの関係の解明
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25462574
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
升田 博隆 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (80317198)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
丸山 哲夫 慶應義塾大学, 医学部, 准教授 (10209702)
内田 浩 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90286534)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 子宮内膜症 / 子宮内膜幹細胞 / 上皮間葉転換（EMT） / Side Population W5C5 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
（1）フローサイトメトリーによりSide Population（SP）細胞、W5C5+細胞、CD146+PDGFRβ+細胞の表面抗原解析を行い相互関係の調べることを複数検体で行った。ヒト子宮内膜SP細胞にはCD146+PDGFRβ+細胞がenrichされていることが確認できたが、W5C5の発現についてはSP細胞と非SP細胞を比較し有意差がでなかった。
（2）NOGマウスの腎皮膜下にヒト子宮内膜細胞を移植した系を作成し100%の確率で再構築組織ができ子宮内膜様腺管構造も確認できたが、W5C5の染色については一切陽性細胞が確認されなかった。条件変更を重ねても陽性例がとれないことより、4%PFA固定のパラフィン切片ではW5C5抗体が機能しないと推測し、凍結切片での染色を予定している。
（3）SP細胞がin vivoでもつ浸潤能をin vitroで再現するため、SP細胞とnon-SP細胞を用いてTranswell migration assayを行った。その結果、SP細胞はnon-SP細胞に比べて高い浸潤能を持つことがわかった。同様の系において、SP細胞培養群にEMT阻害剤を投与し、浸潤能の低下を確認しているが、nが少なく有意差に至っていない。
（4）より簡潔に遊走能（浸潤能）を確認するため、SP細胞を2次元培養しwound healing assayを施行した。EMT阻害薬添加群と非添加群の比較により、添加群では遊走能の低下が明らかとなった。この結果は、EMT阻害薬がSP細胞の遊走能（間葉的性質）を押さえる可能性が示唆された。
（5）In vivoにおけるEMT阻害剤の浸潤能抑制効果を見るため、NOGマウスの腎皮膜下にヒト子宮内膜細胞を移植した系を用いて、再構築組織の組織学的評価を行っている。浸潤能を見るため免疫組織化学染色によるヒト由来細胞の動態とEMTマーカーの発現を検討中である。
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[Journal Article] CD34 and CD49f double-positive and lineage marker-negative cells isolated from human myometrium exhibit stem cell-like properties involved in pregnancy-induced uterine remodeling.2015
Author(s)
Ono M, Kajitani T, Uchida H, Arase T, Oda H, Uchida S, Ota K, Nagashima T, Masuda H, Miyazaki K, Asada H, Hida N, Mabuchi Y, Morikawa S, Ito M, Bulun SE, Okano H, Matsuzaki Y, Yoshimura Y, Maruyama T
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Journal Title
Biol Reprod
Volume: 93巻
Pages: 1-9
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Non-invasive and real-time assessment of peritoneal lesions generated from human endometrial cell transplants locally accumulated by magnetic force in immunodeficient mice.2015
Author(s)
Tetsuo Maruyama, Hirotaka Masuda, Naoko Hida, Hideyuki Oda, Kaoru Miyazaki, Miki Fumie, Hanako Hihara, Kuniaki Ota, Hiroshi Uchida, Mamoru Tanaka
Organizer
31th Annual Meeting of the European Society of Human Reproduction and Embryology (ESHRE).
Place of Presentation
Lisbon, Portugal.
Year and Date
2015-06-14 – 2015-06-17
Int'l Joint Research
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