子宮内膜の性周期および発癌過程におけるPITX1発現とテロメレース制御の解析

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25462593
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 蝦名 康彦 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90322809)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 子宮内膜 / テロメレース

Research Abstract

テロメレース活性制御遺伝子の機能の理解は，テロメア・テロメレースが関与する細胞老化およびがんの発生・進展の病態解明に加えて，早期診断薬や創薬へと展開できる可能性がある．本研究ではPITX1の，子宮内膜の性周期および発癌過程における発現と，テロメレース制御について解明することを目的とする．
① PITX1などテロメレース関連および細胞増殖因子発現に関する免疫組織化学的検討
患者の同意が得られた手術検体ホルマリン固定組織を用いて，子宮内膜PITX1，TERT，Ki-67，ERα，PR，ｐ53の免疫組織化学を行う．対象としては子宮体癌・内膜増殖症のみならず，子宮筋腫など良性疾患で子宮摘出を行い，月経周期や閉経状態の判明している組織検体も用いる．
② PITX1などテロメレース関連因子のmRNA発現の定量的検討
患者の同意の得られた月経周期の判明している内膜日付診の子宮内膜，基礎疾患を有しない健常婦人ボランティアの月経周期が確認できる子宮内膜，手術時に得られた異型内膜増殖症，体癌の生凍結組織を用いて以下の解析を行う．月経周期，ホルモン状態，閉経状態，年齢との関連を，また癌組織においては組織型，I型/II型，組織分化度，臨床進行期，予後との関連についても検討する．SYBR Green で定量不能の場合は、特異性を高めるためプライマーに標識プローブを用いたシステムを使用する。前段階におけるTERT 免疫組織化学が計画通りに進まない時の対応として，凍結組織検体をよるTRAP 法を用いることを予定する．また免疫組織化学による解析で判明している組織内の発現の差を明らかにするため，
レーザーキャプチャー法で腫瘍部分，非腫瘍部分を分離して上記を検討することも考慮する．

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

検体準備に時間がかかった．第一段階としての免疫染色化学を行うための準備は終了しているが，その後の実験段階に入るところである．実験に関する事前準備に時間を要した．

Strategy for Future Research Activity

H25年実施予定の研究を施行しながら，結果をふまえてH26年度の研究も並行して行っていく．

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

検体準備に時間がかかるなど．第一段階としての実験を行うための準備は終了しているが，実際に実験段階に入れず支出が少なく終わった．実験に関する事前準備に時間を要した．
H26年度には，計画実施をみなおして，H25年実施予定の研究を施行しながら，H26年度の研究も並行して行っていく計画である．