ANXA4サブタイプの機能解析に基づく卵巣明細胞腺癌の抗がん剤耐性克服戦略の研究

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25462602
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 宮城 悦子 横浜市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (40275053)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宮城 洋平 地方独立行政法人神奈川県立病院機構神奈川県立がんセンター(臨床研究所), がん分子病態部, 総括部長 (00254194) ; 山田 六平 地方独立行政法人神奈川県立病院機構神奈川県立がんセンター(臨床研究所), がん生物学部, 技幹 (30404974)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 卵巣がん / パクリタキセル耐性 / annexinA4 / 卵巣明細胞腺がん

Outline of Annual Research Achievements

前年度は，annexinA4 (A4) タンパク質のうち，等電点電気泳動をすることで判別できる酸性型-annexinA4 (acidic-A4)と塩基性型- annexinA4 (basic-A4)の2種類のサブタイプのうち，acidic-A4が明細胞腺がん細胞のプラチナム系抗がん剤耐性に関わる一方で，basic-A4はパクリタキセル耐性に関与する可能性を示す結果を得た．そこで，本年度は，acidic-A4，basic-A4の質的な違いを明らかにすべく，A4-タンパク質の免疫沈降による濃縮と，質量分析によるアミノ酸配列や翻訳後修飾などの相違解析を試みた．残念ながら市販の抗A4抗体での免疫沈降や，FLAG-Tagを付加したA4タンパク質の発現と抗FLAG抗体での免疫沈降を試みたが，いずれも免疫沈降による濃縮はできなかった．
そこで， A4タンパク質によるパクリタキセル耐性機能に注目して解析を進めた．これまでの我々の研究で，A4依存性にパクリタキセル耐性を示すbasic-A4優位型の明細胞腺がん細胞OVISEが， A4発現をshRNAでノックダウンされると，並行してlysosomal associated membrane protein 2 (LAMP2)タンパク質の発現が減弱することを見いだしている．パクリタキセル耐性がアポトーシスによる細胞死シグナルをオートファジーに変換することで生ずるとの結果が乳がん細胞を使ったin vitroの研究で示されていることから，外科切除卵巣がん組織を用いた免疫染色による関連タンパク質の発現解析を行った．明細胞腺がんを含む複数の組織型の卵巣がんでLAMP2の高発現が観察され，また，beclin-1，APG16Lなどのオートファジー関連遺伝子の高度な発現も認められた．現在，annexinA4発現強度との相関を解析している．

Research Products

• [Journal Article] High-level secretion of tissue factor-rich extracellular vesicles from ovarian cancer cells mediated by filamin-A and protease-activated receptors (2016)
  • Author(s): Koizume S, Ito S, Yoshioka Y, Kanayama T, Nakamura Y, Yoshihara M, Yamada R, Ochiya T, Ruf W, Miyagi E, Hirahara F, Miyagi Y
  • Journal Title: Thromb Haemost Volume: 115 Pages: 299-310
  • DOI: 10.1160/TH15-03-0213
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Phase II study of concurrent chemoradiotherapy with weekly cisplatin and paclitaxel in patients with locally advanced uterine cervical cancer: The JACCRO GY-01 trial (2016)
  • Author(s): Umayahara K, Takekuma M, Hirashima Y, Noda S, Ohno T, Miyagi E, Hirahara F, Hirata E, Kondo E, Tabata T, Nagai Y, Aoki Y, Wakatsuki M, Takeuchi M, Toita T, Takeshima N, Takizawa K
  • Journal Title: Gynecol Oncol Volume: 140 Pages: 253-256
  • DOI: 10.1016/j.ygyno.2015.12.008
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Aberrant expression of the cell polarity regulator aPKC λ/ι is associated with disease progression in cervical intraepithelial neoplasia (CIN): A possible marker for predicting CIN prognosis (2016)
  • Author(s): Mizushima T, Asai-Sato M, Akimoto K, Nagashima Y, Taguri M, Sasaki K, Nakaya MA, Asano R, Tokinaga A, Kiyono T, Hirahara F, Ohno S, Miyagi E
  • Journal Title: Int J Gynecol Pathol Volume: 35 Pages: 106-117
  • DOI: 10.1097/PGP.0000000000000228
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Aberrant expression of erythropoietin in uterine leiomyoma: implications in tumor growth (2015)
  • Author(s): Asano R，Asai-Sato M，Miyagi Y，Mizushima T，Koyama-Sato M，Nagashima Y，Taguri M，Sakakibara H，Hirahara F，Miyagi E
  • Journal Title: Am J Obstet Gynecol Volume: 213 Pages: 1-9
  • DOI: 10.1016/j.ajog.2015.02.016
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Radiation Therapy for Para-Aortic Lymph Node Metastasis from Uterine Cervical Cance (2015)
  • Author(s): Hata M，Miyagi E，Koike I，Numazaki R，Asai-Sato M，Kasuya T，Kaizu H，Mukai Y，Hirahara F，Inoue T
  • Journal Title: Anticancer Res Volume: 35 Pages: 4849-4854
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Three-year questionnaire survey on human papillomavirus vaccination targeting new female college students (2015)
  • Author(s): Sukegawa A, Ohshige K, Arai S, Sakanashi K, Usui M, Hirahara F, Miyagi E
  • Journal Title: J Obstet Gynaecol Res Volume: 41 Pages: 99-106
  • DOI: 10.1111/jog.12500
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Postoperative radiation therapy for extramammary Paget's disease (2015)
  • Author(s): Hata M, Koike I, Wada H, Miyagi E, Kasuya T, Kaizu H, Mukai Y, Inoue T
  • Journal Title: Br J Dermatology Volume: 172 Pages: 1014-1020
  • DOI: 10.1111/bjd.13357
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Lipid starvation and hypoxia synergistically activate ICAM1 and multiple genes in an Sp1-dependent manner to promote the growth of ovarian cancer (2015)
  • Author(s): Koizume S, Ito S, Nakamura Y, Yoshihara M, Furuya M, Yamada R, Miyagi E, Hirahara F, Takano Y, Miyag Y
  • Journal Title: Mol Cancer Volume: 14 Pages: 77
  • DOI: 10.1186/s12943-015-0351-z
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Increasing trends in cervical cancer mortality among young Japanese women below the age of 50 years: an analysis using the Kanagawa population-based Cancer Registry, 1975-2012 (2015)
  • Author(s): Motoki Y, Mizushima S, Taguri M, Takahashi K, Asano R, Kato H, Asai-Sato M, Katayama K, Okamoto N, Hirahara F, Miyagi E
  • Journal Title: Cancer Epidemiol Volume: 39 Pages: 700-706
  • DOI: 10.1016/j.canep.2015.08.001
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 日本の子宮頸がん予防の将来を考える～横浜・神奈川子宮頸がん予防プロジェクトから見えてきた意識と行動の課題～ (2015)
  • Author(s): 宮城悦子
  • Organizer: 第34回神奈川県臨床細胞学会学術集会
  • Place of Presentation: 相模原南メディカルセンター（神奈川県相模原市）
  • Year and Date: 2015-10-03 – 2015-10-03
  • Invited
• [Presentation] International comparison of background to the success or failure of HPV vaccination programmes (2015)
  • Author(s): Konnno R, Miyagi E, Hanley S
  • Organizer: HPV2015 (30th International Papillomavirus Conference & Clinical Workshop)
  • Place of Presentation: Lisbon (Portugal)
  • Year and Date: 2015-09-17 – 2015-09-21
  • Int'l Joint Research